Categoria cosmética CAS da preparação de enzima da pectase do colesterol NENHUM 9026-00-0

A pectase do colesterol catalisa a hidrólise de ésteres do sterol em seus sterols componentes e ácidos gordos. A enzima é encontrada primeiramente no pâncreas, mas foi detectada em outros tecidos também. Os sais de bilis, tais como o cholate e os seus conjugado, são exigidos para estabilizar a enzima em seu formulário polimérico nativo e para protegê-la da hidrólise proteolytic no intestino (Vahouny e Treadwell 1968). A pectase do colesterol encontra aplicações clínicas na determinação do colesterol de soro (Allain e outros 1974).

História:

Ao longo dos 1900s adiantados a síntese e a hidrólise enzymatically catalisadas de ésteres do colesterol na presença de determinados tecidos foram observadas e descritas (Kondo 1910, Schultz 1912, Cytronberg 1912, Gardner e Lander 1913, Mueller 1916, porteiro 1916, Nomura 1924, Shope 1928, Nedswedski 1935, Klein 1939, Sperry 1935, e Sperry e Stoyanoff 1937).

Em 1949 e 1950, dois papéis foram publicados como parte de um estudo extensivo na pectase do colesterol. Esta pesquisa descreveu um método para a preparação de enzima bruta que se centrou sobre a importância de emulsões estáveis do colesterol e os ésteres do colesterol para a atividade (Yamamoto e outros 1949, e inchamento e Treadwell 1950). Ao longo dos anos 50, a pectase do colesterol do soro e os vários tecidos foram estudados (Korzenovsky 1960). Em 1957, Hernández e Chaikoff estudaram as propriedades da pectase pancreático do colesterol especificamente e planejaram um método turbidimetric rápido para a avaliação enzimático da atividade (Hernández e Chaikoff 1957).

Nos anos 60, Vahouny estudou e outros métodos para proteger a pectase do colesterol da inativação proteolytic (Vahouny e outros 1964). Este estudo acoplado com a correlação conhecida entre a doença cardiovascular e o colesterol de soro alto (chaves 1980, e o Goldstein e o Brown 2003) conduziu ao desenvolvimento de métodos totais da determinação do colesterol de soro usando a pectase do colesterol (Allain e outros 1974).

Em 1989, Kyger arranjou em sequência e outros um clone do cDNA da pectase pancreático bovina do colesterol. Em 1994, o estudo do marco “4S” mostrou que pela primeira vez aquele que abaixa níveis de LDL com o uso dos statins poderia impedir cardíaco de ataque e prolongar a vida (Goldstein e Brown 2003). Com tais opções do tratamento disponíveis e a necessidade para testar o colesterol total no soro que aumenta dramaticamente, a pectase do colesterol tem tornado das enzimas as mais amplamente utilizadas em laboratórios clínicos (MacLachlan 2000).

Especificidade:

A pectase do colesterol é sintetizada nas pilhas acináceas do pâncreas, armazenada em grânulo do zymogen, e segregada como um componente do suco pancreático no lúmen do intestino delgado (Labow e al.1983). A pectase do colesterol hydrolyzes uma vasta gama de carcaças do éster que incluem ésteres do cholesteryl, acylglycerides, phospholipids (Brockerhoff e Jensen 1974), ésteres do retinyl (Fredrikzon e outros 1978), ésteres da vitamina, e ésteres do phenyl (Rudd e Brockman 1984). A enzima foi encontrada igualmente para ter a atividade do amidase (Hui e outros 1993). A enzima é útil como um biocatalizador devido a sua capacidade para catalisar reações do transacylation em um ambiente água-limitado (Gallo e outros 1977, Kazlauskas 1989, e Feaster e outros 1996).

Características moleculars:

O gene que codifica a pectase do colesterol nos porcos (lipA) é ficado situado no cromossoma 14 (identificação do GENE: 100142668). O gene de LIPA é conservado no ser humano, chimpanzé, cão, vaca, rato, rato, galinha, zebrafish, mosca de fruto, mosquito, elegans do C., pombe do S., S. cerevisiae, gossypii do E., grisea do M., cassa do N., thaliana do A., e arroz.

Composição:

A pectase do colesterol é uma glicoproteína que na presença dos agregados de sais a um hexamer (Hyun e outros 1971). A pectase do colesterol pertence à família da dobra da alfa/hidrolase (Ollis e outros 1992, e a Cygler e outros 1993). A maioria de membros desta família são pectases e características secundárias e terciárias da parte. Quase todos usam um mecanismo catalítico da pectase do serine, que se assemelhe àquele dos proteases do serine (Kraut 1977).

Número de adesão da proteína: NP_001116606

Peso molecular:

• Monômero: kDa 65 (Hyun e outros 1971)
• Monômero: kDa 43,3 (teórico)
• Hexamer: kDa 400 (Hyun e outros 1971)

PH ótimo:

• Para a esterificação, 6.1-6.2 (Vahouny e Treadwell 1968)
• Para a hidrólise, 6.6-7.0 (Vahouny e Treadwell 1968)

Ponto isoelétrico:

• 7,91 (teórico)

Coeficiente de extinção:

• 86.680 cm^-1 M^-1 (teórico)
• E_1%,280 = 20,01 (teórico)

Resíduos ativos do local:

• Serine (S194)
• Histidine (H435)
• Aspartato (D320)

Ativadores:

• Sais de bilis
• Cholate (Vahouny e outros 1964)
• Glycocholate (Vahouny e outros 1964)
• Taurocholate (Vahouny e outros 1964)

Inibidores:

• PMSF e p-chloromercuribenzoate (Hyun e outros 1971, e Vahouny e outros 1964)
• Fluorophosphate Diisopropyl (Momsen e Brockman 1976)
• Hectograma²⁺, AG ⁺, e detergentes iônicos
• Carbamato arílicos (Feaster e outros 1996)

Aplicações:

• Determinação do colesterol no soro e no plasma, com oxidase do colesterol ou peroxidase
• Síntese de álcoois opticamente ativos e de ácidos carboxylic (através da hidrólise, da esterificação, ou do transesterification do éster)