99% Min White Tris Aminomethane (Hydroxymethyl) CAS No 77-86-1

A diferença entre o fenol saturado aminomethane do trimethylol e o fenol saturado água

Tris (aminomethane do trihydroxymethyl) porque um amortecedor biológico de uso geral tem uma vasta gama mesma de aplicações no campo da indústria bioquímica, tal como a purificação ácida nucleica. Há dois tipos de fenóis saturados na purificação ácida nucleica. Um é fenóis saturados Tris, igualmente conhecidos como fenóis básicos, Tris equilibrou os fenóis (o saturatedphenol dos tris ou Tris equilibraram fenóis), que são claros - o líquido transparente amarelo saturado com tris clph8.0 a camada superior era amortecedor do ácido clorídrico de Tris, e o hydroxyquinoline do antioxidante 8 foi adicionado na solução. É apropriado para remover a proteína e extrair o ADN das amostras ácidas nucleicas.

O pH de Tris saturou fenóis é geralmente mais alto de 7,8, entre que o fenol é um desnaturalizador forte da proteína, que possa denaturate e para precipitar proteínas nas pilhas ou nos tecidos. A função principal de Tris é impedir e controlar a oxidação dos fenóis. Se os fenóis são oxidados, as quinona (dois anéis de benzeno) estarão formadas. As quinona contêm os radicais livres fortes, que destruirão a estrutura de ácidos nucleicos. Ao mesmo tempo, devido ao valor de pH maior de 7, ADN realizam-se na fase aquosa e o RNA realiza-se na fase orgânica no ambiente alcalino. O supernatant foi separado e o ADN foi obtido.

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O outro é fenol ácido, ou o fenol saturado água, que é usado para extrair o RNA. É chamado igualmente água fenol saturado água ou fenol equilibrado. O pH do fenol saturado água é geralmente 4.7-5.5. É usado geralmente junto com o isothioate do guanidine (ou os 0,1%, 0,2% β - mercapto, o álcool etílico) para extrair o RNA das pilhas, de modo que o ADN se realize na fase do fenol e o RNA se realize na fase da água. Os dois são separados.

A configuração de Tris saturou o fenol:

1. Remova o re fenol cozinhado do refrigerador e coloque-o no banho maria de 68 ℃ na temperatura ambiente para dissolvê-la. Não a põe no banho maria de 68 ℃ imediatamente para impedir que o vidro se rache;

2. Adicione o hydroxyquinoline 8 a 0,1% e o β - mercaptoethanol a 0,2% (solução conservada em estoque 14.4mol/ml), misture-os bem, a solução gerencie amarelo, e derrama-a no funil de separação (pode igualmente ser realizada em uma taça);

3. Adicione 1mol/ml dos tris (ph8.0) do mesmo solvente, misture-o repetidamente, e deixe-o estar ainda até que esteja mergulhado; libere a solução amarela do fenol na camada mais baixa e rejeite a camada superior;

4. Adicione Tris contínuo sobre o fenol 1g/100ml, agite-o bem e para remover a fase aquosa;

5. Adicione 0.1mol/mltris (ph8.0) para equilibrar diversas vezes até que o pH esteja 8,0;

6. Adicione 0.1mol/mltris (ph8.0) para bronzear a garrafa e a loja no ℃ 4;

7. Se o amarelo desaparece ou gerencie o rosa (que indica que o fenol esteve oxidado), não pode ser usado.

O re fenol evaporado é uma agulha branca como o cristal com corrosividade forte. Deve ser evitado para contactar com pele ou inala no corpo na medida do possível. Se gerencie vermelho ou marrom, indica a oxidação e não pode ser usado. A condição de armazenamento deve ser mantida longe da luz - no ℃ 20. Tris saturou fenóis é as substâncias tóxicas e irritantes, que precisam de ser operadas na capa das emanações.