Wuhan Desheng Biochemical Technology Co., Ltd

Em experimentos bioquímicos,Reservatório CAPSComo um importante amortecedor alcalino, é amplamente utilizado na absorção Western, em reacções catalisadas por enzimas e na separação HPLC devido ao seu valor de pKa estável (cerca de 10,4), boa solubilidade em água (até 11,5%).07 mg/ml a 25 °C)No entanto, os experimentadores constatam frequentemente que a solubilidade do CAPS diminui significativamente a baixas temperaturas (como 4 °C ou -20 °C),levando a dificuldades na preparação do amortecedor ou concentração desigualEste artigo analisará este fenômeno a partir de três níveis: mecanismos moleculares, fatores ambientais e operações experimentais,e propor soluções de otimização específicas. Mecanismo molecular de diminuição da solubilidade a baixa temperatura O processo de dissolução do CAPS é essencialmente o processo de suas moléculas formando uma camada de hidratação com moléculas de água através de ligação de hidrogênio.o grupo de ácido sulfónico (- SO3H) e o grupo amino (- NH-) nas moléculas de CAPS combinam-se com as moléculas de água através de interações polares para formar complexos de solventes solutos estáveisContudo, à medida que a temperatura diminui, o movimento térmico das moléculas de água enfraquece, e a rede de ligação de hidrogénio tende a tornar-se rígida.resultando numa diminuição da energia de ligação entre as moléculas de CAPS e as moléculas de águaOs dados experimentais mostram que a solubilidade do CAPS diminui cerca de 30% a 4 °C em comparação com 25 °C, o que está estreitamente relacionado com alterações nas propriedades dinâmicas das moléculas de água. Além disso, o comportamento de cristalização do CAPS sofre mudanças significativas a baixas temperaturas.Quando a temperatura cai abaixo do ponto crítico, as moléculas formam uma estrutura reticular ordenada através de interações hidrofóbicas e empilhamento π - π.Este processo de transição de fase reduz ainda mais a solubilidade do CAPS e até leva à precipitação de partículas sólidas não dissolvidasPor exemplo, quando se prepara uma solução tampão de CAPS, se o solvente não for suficientemente pré-aquecido, podem freqüentemente ser observados precipitados floculantes brancos.que é uma manifestação direta da cristalização induzida a baixa temperatura. Efeito sinérgico dos factores ambientais na solubilidade Em experimentos de força de íons de solvente, a água desionizada é frequentemente usada para preparar solução tampão CAPS.Formarão complexos com os grupos de ácido sulfónico nas moléculas CAPSEm temperaturas baixas, a hidratação dos íons é reforçada, a estabilidade do complexo é melhorada e a diminuição da solubilidade é ainda mais exacerbada.Por exemplo:, numa solução contendo 0,1 mM Ca 2 +, a solubilidade do CAPS a 4 °C é reduzida em 15% em comparação com o sistema de água pura. A solubilidade do CAPS está estreitamente relacionada com o seu estado de dissociação devido às flutuações do pH. Quando o pH é inferior a pKa (10,4), as moléculas de CAPS existem em forma protonada (- SO3H) com alta solubilidade;Quando o pH se aproxima ou excede o pKa, a solubilidade da forma desprotonada (- SO −) diminui significativamente.o valor do pH da solução tampão pode desviar devido à dissolução de CO2 ou à hidrólise de impurezas, afetando indiretamente o comportamento de dissolução dos CAPS. Compreendendo o mecanismo molecular e os fatores ambientais que contribuem para a diminuição da solubilidade a baixa temperatura do CAPS,Os investigadores podem otimizar o processo de preparação e as condições de armazenagem de forma específica para garantir a estabilidade do desempenho do tampãoNo futuro, com o desenvolvimento de novos agentes de amortecimento zwitteriónicos, espera-se que as limitações do CAPS em experimentos a baixas temperaturas sejam fundamentalmente resolvidas. Como profissionalAgente de amortecimento biológicoA Desheng está empenhada em fornecer agentes tampão CAPS de alta qualidade.Não só temos pessoal profissional para supervisionar e controlar o processo desde o uso da matéria-prima até a preparação da fábrica, mas também otimizar continuamente os métodos de teste para atender às diversas necessidades dos nossos clientes.Por favor, sinta-se à vontade para clicar no site para perguntar sobre detalhes e compra a qualquer momento!

Em culturas celulares e experiências biológicas,Reservatório HEPESO primeiro é usado para manter a estabilidade do pH no meio de cultura, enquanto o segundo é usado para exibir visualmente as alterações do pH.a interação entre os dois em termos de propriedades químicas pode levar a anormalidades de corEste artigo irá analisar as causas deste fenômeno e fornecer soluções de otimização simplificadas. Base química da interferência de cor O vermelho fenólico é um corante sensível ao pH que muda de cor com a acidez ou a alcalinidade: aparece amarelo em ambientes ácidos (pH < 6,8), vermelho em ambientes neutros (pH ≈ 7,4),e vermelho-púrpura em ambientes alcalinos (pH> 8.2) Esta característica torna-o um instrumento ideal para a monitorização do pH dos meios de cultura celular. A função principal do HEPES como amortecedor é estabilizar o pH liberando ou absorvendo íons hidrogênio.O problema é que os grupos de ácido sulfónico nas moléculas de HEPES têm uma estrutura química semelhante ao fenol vermelho, e quando a concentração de HEPES é elevada, eles vão interagir com o fenol vermelho para mudar a sua estrutura molecular.Esta mudança faz com que a cor do vermelho do fenol se torne mais clara ou mude em um pH específico, por exemplo, pode aparecer de vermelho laranja em vez de vermelho padrão a pH 7.4. A manifestação intuitiva do fenômeno de interferência Na cultura de células convencional, se forem utilizadas simultaneamente altas concentrações de HEPES (como mais de 20 mmol/L) e vermelho fenólico, a cor do meio de cultura pode ser mais clara ou amarelada do que o esperado..Por exemplo, o meio de cultura de pH 7,4, que deveria ter sido exibido em vermelho, pode ter-se tornado laranja pálido devido à interferência do HEPES, levando os investigadores a julgarem erroneamente o valor do pH. Na observação por microscopia de fluorescência, esta interferência é mais pronunciada.resultando em diminuição do brilho da imagem ou aumento do ruído de fundoEste efeito é particularmente proeminente na observação a longo prazo ou em experimentos de imagem de células vivas, que podem mascarar o verdadeiro estado das células. Plano de otimização simplificado Ajustar a concentração de HEPES 1- Cultivo convencional: Controle a concentração de HEPES dentro de 10-15 mmol/L, o que tem interferência mínima no desenvolvimento da cor do vermelho fenólico e pode efetivamente manter a estabilidade do pH. 2Experimento de curta duração: se o tempo experimental for curto (por exemplo, < 4 horas), a concentração de HEPES pode ser ainda reduzida para 5 mmol/L, ou somente adicionada quando necessário. 3Células sensíveis: Para as células que são extremamente sensíveis às alterações do pH (como os neurónios), recomenda- se utilizar um sistema tampão de bicarbonato em vez de HEPES ou remover completamente o vermelho do fenólio. Métodos alternativos de renderização de cores 1Mediante de cultura livre de fenol vermelho: Para experimentos que exijam altas concentrações de HEPES, pode ser selecionado um meio de cultura sem fenol vermelho.e tiras de ensaio de pH ou medidores eletrónicos de pH podem ser utilizados para monitorizar a acidez e a alcalinidade. 2. sondas fluorescentes: Usando corantes fluorescentes como BCECF-AM em vez de vermelho fenol, estas sondas não são afetadas pela interferência HEPES e podem fornecer medições de pH mais precisas. 3Correcção de cor: Se HEPES e vermelho fenol tiverem de ser utilizados simultaneamente, pode ser preparada antecipadamente uma curva padrão para corrigir o desvio de cor observado através do método colorimétrico. Optimização do projeto experimental 1. Buffering em estágios: utilizar HEPES para manter o pH durante a fase de pré-cultura de células e mudar para um meio de cultura sem HEPES antes da imagem para reduzir a interferência. 2. Selecção de comprimento de onda: na imagem de fluorescência,evitar o comprimento de onda principal de absorção do vermelho fenol (como 560nm) e escolher um canal de fluorescência de comprimento de onda mais longo (como 633nm) para reduzir a interferência de fundo. 3Configuração de controlo: para cada experimento foi criado um grupo de controlo sem HEPES para comparar visualmente as diferenças de cor. Compreendendo o mecanismo de interação entre HEPES e fenol vermelho,Os pesquisadores podem facilmente ajustar as condições experimentais para garantir a confiabilidade dos resultados do desenvolvimento da cor, mantendo a estabilidade do sistema de culturaPara experimentos complexos, recomenda-se realizar primeiro pré-experimentos em pequena escala para verificar a eficácia do esquema de otimização. A Hubei Xindesheng Material Technology é especializada na produção de HEPES e outrosAgentes de amortecimento biológicosOs produtos têm alta pureza, boa capacidade de amortecimento e preços acessíveis, fornecendo suporte ao produto para experimentos relacionados.Por favor, sinta-se à vontade para me contactar!

No uso deo novo reagente do Trinder TODB, o fundo alto é um problema comum que afeta os resultados de detecção, enquanto a vedação insuficiente e a lavagem incompleta dos pratos são fatores-chave que são facilmente negligenciados durante a operação.Estes dois problemas podem causar um aumento anormal do fundo de cor devido à ligação não específica e interferência de substâncias residuaisAbaixo está uma análise detalhada e uma solução. Fechamento inadequado: força motriz "nos bastidores" das combinações não específicas A função da etapa de bloqueio é bloquear os locais não ligantes na superfície do transportador de reação (como uma placa de ensaio de imunossorbente ligada à enzima).Os substratos, conjugados enzimáticos e outros componentes do reagente TODB adsorvem-se aleatoriamente na superfície do suporte, formando um sinal de cor sem a participação da substância-alvo,aumentando diretamente o valor de fundo. Razão específica 1- Tempo de vedação insuficiente: em geral, a vedação requer a colocação a 37 °C durante 60 minutos ou a temperatura ambiente durante 120 minutos.Os locais ativos na superfície do suporte não podem ser completamente cobertos pela solução de bloqueio (como BSA), leite em pó desnatado), e as áreas hidrofóbicas que não estão bloqueadas adsorvem ativamente os componentes proteicos no sistema de reação TODB, resultando em coloração de fundo. 2. concentração demasiado baixa da solução bloqueadora: quando os ingredientes eficazes da solução bloqueadora são insuficientes, por exemplo, quando a concentração original de 5% BSA cai para 1%,não se pode formar uma película protetora apertada entre as moléculasOs componentes como a peroxidase do rabanete em reagente TODB aderirão à parede interna do poro da placa através de interações hidrofóbicas,e ocorrerão reacções não específicas com o substrato durante a reação. 3- Falha da solução de vedação: se a solução de vedação for congelada e derretida repetidamente, ou conservada durante mais tempo do que a data de validade,Os componentes proteicos no interior vão deteriorar e perder a sua função de vedação, resultando em muitos locais "expostos" na superfície do portador, que se tornam a fonte de sinais de fundo. Lavagem incompleta de placas: o "efeito de empilhamento" das substâncias residuais A principal função da lavagem dos pratos é a de remover reagentes livres não ligados (como anticorpos não ligados, substâncias precursoras do TODB).As substâncias residuais continuarão a participar no desenvolvimento da cor nas reações subsequentes., permitindo que a interferência de fundo se acumule. Razão específica 1. Poucas lavagens de pratos: os testes convencionais exigem a lavagem da placa 3-5 vezes. Se for reduzida a menos de 2 vezes, os complexos de enzimas livres residuais no poço não podem ser completamente removidos,e a reação irá reagir com o substrato TODB, resultando em desenvolvimento de cor adicional. 2. Demasiado resíduo de detergente: Após a lavagem do quadro, se os furos não forem invertidos no papel absorvente e secados, haverá mais resíduo de detergente em cada buraco,e alguns componentes no interior vão perturbar o equilíbrio do sistema de reação TODBAo mesmo tempo, os conjugados enzimáticos residuais irão difundir-se nos furos adjacentes com o líquido, causando contaminação cruzada e elevando o fundo. 3- Há um problema com a máquina de lavar: quando a agulha da máquina de lavar está bloqueada ou a pressão é insuficiente,os cantos dos buracos das placas se tornarão áreas que não podem ser lavadasO reagente TODB residual cristalizará após a secagem e participará da reação quando novamente dissolvido, fazendo com que a cor de fundo local escureça. Resumo: Detalhes operacionais determinam a eficácia do controlo de fundo Embora a vedação e a lavagem das placas sejam passos de rotina, a sua qualidade afecta directamente o nível de fundo dos reagentes TODB.Recomenda-se a adoção do método "prolongar o tempo de vedação+aumentar o número de lavagens de pratos", combinado com medidas como a verificação da concentração da solução de vedação e a calibração regular da máquina de lavar roupa,que podem reduzir significativamente o valor de fundo e garantir a precisão dos resultados da detecção. A Desheng é especializada na produção de mais de dez novos reagentes da Trinder, incluindo o TODB.pode assegurar que o TODB aparece como pó com uma pureza de até 990,5%, forte solubilidade em água e desempenho estável para garantir a precisão dos resultados experimentais.A Desheng tem um lugar no mercado de matérias-primas de kits de diagnóstico in vitro com produtos de alta qualidade, e é profundamente confiável e apoiado por clientes no país e no exterior.  

No campo da detecção bioquímica, a seleção de corantes desempenha um papel crucial na sensibilidade, precisão e estabilidade dos métodos de detecção. Atualmente, existem vários tipos de corantes no mercado, como o TMB, amplamente utilizado no ensaio imunoenzimático (ELISA), que se tornou uma escolha comum para muitos cenários de detecção devido à sua ampla aplicabilidade. No entanto, na detecção de indicadores específicos, o novo reagente de Trinder demonstrou um desempenho único e excelente, com reagente TOPS mostrando vantagens significativas na determinação de ácidos graxos. Vantagens notáveis em sensibilidade e precisão Na detecção biológica, sensibilidade e precisão são os indicadores centrais para medir a qualidade dos métodos de detecção. Ao usar o reagente TOPS para determinar ácidos graxos livres (AGL) no soro, sua sensibilidade é extremamente excelente. O conteúdo de ácidos graxos livres no soro no corpo é relativamente baixo, e mesmo pequenas alterações em sua concentração podem estar intimamente relacionadas a vários estados fisiológicos e patológicos. Os reagentes TOPS podem capturar com precisão essas sutis mudanças de concentração, e mesmo baixas concentrações de ácidos graxos livres no soro podem ser efetivamente detectadas, fornecendo suporte de dados mais preciso para diagnóstico clínico e pesquisa. Enquanto isso, os reagentes TOPS são igualmente precisos. Durante o processo de detecção, ele pode minimizar a influência de fatores interferentes e garantir que os resultados da detecção reflitam verdadeira e confiavelmente o conteúdo de ácidos graxos livres no soro. Comparado com alguns corantes tradicionais, os resultados da detecção do reagente TOPS têm maior repetibilidade e consistência, evitando efetivamente erros causados por propriedades instáveis dos corantes e fornecendo uma base sólida para pesquisa científica e tomada de decisões clínicas. Operação fácil e conveniente Além da alta sensibilidade e precisão, a facilidade de operação também é um destaque importante dos reagentes TOPS. Em testes práticos, o método de usar TOPS como um substrato cromogênico para detectar AGL no soro ou plasma é relativamente simples em etapas, sem a necessidade de equipamentos instrumentais complexos e procedimentos operacionais complicados. Pesquisadores ou pessoal de laboratório clínico só precisam seguir as diretrizes de operação experimental padrão, misturar a amostra com reagentes TOPS e reagentes relacionados e, após um tempo de reação apropriado, detectá-la usando instrumentos convencionais, como espectrofotômetros. Este método de operação simples e conveniente não apenas melhora a eficiência da detecção e reduz os custos experimentais, mas também reduz os erros causados por erros operacionais, tornando os resultados da detecção mais confiáveis. Excelente desempenho em múltiplos padrões Entre inúmeros corantes de Trinder, o reagente TOPS se destaca em vários indicadores-chave de desempenho. Em segundo lugar, os reagentes TOPS têm alta estabilidade. Durante o armazenamento e uso, não é facilmente decomposto ou deteriorado e pode manter sua estabilidade química por um longo tempo, fornecendo garantia confiável para a detecção. Além disso, a absortividade molar do reagente TOPS é alta, o que significa que ele tem forte capacidade de absorção de luz e pode produzir mudanças de cor significativas em concentrações mais baixas, melhorando assim a sensibilidade e o limite de detecção da detecção. Em resumo, o novo reagente de Trinder TOPS tem vantagens significativas na determinação de ácidos graxos, como alta sensibilidade, boa precisão, operação simples e conveniente e excelentes indicadores de desempenho. Com o desenvolvimento contínuo da tecnologia de detecção biológica, espera-se que os reagentes TOPS desempenhem um papel mais importante no campo da detecção de ácidos graxos, fornecendo um suporte mais forte para a pesquisa em ciências da vida e diagnóstico clínico. Desheng é especializado na produção de mais deos novos reagentes de Trinder, incluindo TOPS. Após mais de dez anos de pesquisa e desenvolvimento, pode garantir que o TOPS apareça como um pó com uma pureza de até 99,5%, forte solubilidade em água e desempenho estável para garantir a precisão dos resultados experimentais. Desheng tem um lugar no mercado de matérias-primas para kits de diagnóstico in vitro com produtos de alta qualidade e é profundamente confiável e apoiado por clientes em casa e no exterior. Se você tiver alguma intenção relevante, clique no site oficial para consulta!