O éster da acridina pode detectar dano do ADN causado pelo formaldeído e pelo acetaldeido!

Os vários fatores exógenos e endógenos, tais como poluentes ambientais, radiação ionizante, quimioterapia da droga, e metabolismo da pilha, podem causar vários formulários de dano do ADN. Entre eles, as rupturas da dobro-costa do ADN têm a maioria de dano grave à estabilidade do genoma e podem ameaçar a sobrevivência das pilhas. Estabelecendo um simples, o método rápido e sensível para detectar efeitos da hibridação e da genotoxicidade do ADN é um assunto de pesquisa muito significativo. Está aqui uma breve introdução ao método da detecção de dano do ADN.

O que são os tipos de detecção de dano do ADN

Os métodos de detecção de dano do ADN incluem a espectrofotometria do eletroforese do gel, a ultravioleta, a fluorescência e a eletroquímica, e a análise da quimioluminescência. A análise da quimioluminescência (CL) foi amplamente utilizada nos campos do ambiente e das ciências da vida devido a sua sensibilidade alta, na escala linear larga, na operação conveniente, na análise rápida, e na automatização fácil. O formaldeído e o acetaldeido são ambos os poluentes ambientais. Até certo ponto, pode causar dano do ADN. Estude a quantidade de ésteres do acridinium encaixados no ADN antes e depois do dano do formaldeído e do acetaldeido, causando mudanças na intensidade da quimioluminescência de ésteres do acridinium, e estude o comportamento de dano do formaldeído e do acetaldeido no ADN. Estabeleça um método de análise simples da quimioluminescência para avaliar o grau de dano do ADN causado pelo formaldeído e pelo acetaldeido.

Método dos ésteres da acridina para detectar dano ao meio ambiente ao ADN

1. Primeiramente, embeba a pilha de vidro da luminescência usada em uma determinada quantia do ácido nítrico concentrado por diversas horas, acidifique-a, e enxágüe-a então com água. Adicione o μL 20 do ADN do thymus da vitela 1mg/mL à pilha acidificada da luminescência, e coloque-o para que 1 hora faça O ADN é fixado na parte inferior da associação luminescente, e então a vitela unadsorbed o ADN do thymus que é lavado com água secundária para obter a associação luminescente com ADN fixou.

2. Adicione 50μL do éster do acridinium 9.6×10-7g/mL à pilha luminescente, e a reação do chimerization é para que 1h encaixe a AE no ADN dobro-encalhou a estrutura, e lava afastado a AE unchimeric com água secundária. Finalmente, na pilha luminescente adicione reagentes da iniciação da luminescência em ordem para detectar a quimioluminescência gerada pela AE chimerized no ADN. Ao detectar o dano do ADN do thymus da vitela pelo formaldeído e pelo acetaldeido, adicione o reagente de dano ao ADN após o chimerization da AE, e use-o após um determinado período de tempo. A segunda água lava afastado a AE liberada depois que o ADN é danificado, e o reagente da iniciação da luminescência está adicionado para detectar a intensidade da quimioluminescência da AE quiméricoa no ADN.

Os estudos mostraram que o éster do acridinium pode ser usado como um indicador da quimioluminescência com uma boa estrutura de intercalar a hélice dobro do ADN. Este método de detecção é praticável para dano da ruptura do ADN e o método de detecção da quimioluminescência. Tem as vantagens da simplicidade e da sensibilidade. Os estudos de dano fornecem um método simples da pesquisa. Os marcadores luminescentes do éster da acridina de Desheng têm as propriedades da boa estabilidade hydrolytic, da estabilidade térmica e da relação de relação sinal-ruído alta, e as circunstâncias de rotulagem são suaves, a taxa de rotulagem é alta, e a separação não afeta a separação após a rotulagem. , Assim considera-se ser um marcador químico ideal.