Aplicação do ácido ethanesulfonic do hydroxyethylpiperazine 4 (HEPES) na detecção do vírus de raiva

4-Hydroxyethylpiperazine ácido ethanesulfonic, abreviatura inglesa HEPES, número de CAS: 7365-45-9, a cor é pó cristalino branco, a escala do valor de PH é 6.8-8.2, sua aplicação mais comum é como um valor de PH biológico do ajuste do amortecedor e sua aplicação em produtos dos cuidados com a pele é amada igualmente por fabricantes principais. Sua aplicação na detecção do vírus de raiva é frequentemente desconhecida. Hoje, o editor de Desheng popularizará o conhecimento relevante para todos.

O vírus de raiva geralmente não produz cytopathic (CPE) quando reproduz em pilhas contaminadas, e não é fácil formar chapas sob condições convencionais da cultura. Embora muitos eruditos no país e no estrangeiro estabelecessem a erosão do vírus de raiva em pilhas do embrião da galinha e em pilhas BHK-21. Os métodos do ponto, mas estes métodos exigem circunstâncias experimentais restritas, ou as operações são complicadas e difíceis de dominar, que afetam seus divulgação e uso. Depois que os pesquisadores encontraram que 4 o hydroxyethylpiperazine HEPES ácido ethanesulfonic pode aumentar o efeito patogênico do vírus de raiva em pilhas contaminadas, usaram esta característica de HEPES para estabelecer um método simples e rápido da chapa de HEPES para o vírus de raiva.

O efeito de HEPES na formação de chapa do vírus de raiva

Depois que as pilhas contaminadas foram cultivadas em 37°C por 3 a 5 dias, as pilhas contaminadas tratadas com o HEPES desenvolveram mudanças cytopathic óbvias na parte inferior da coberta. Após a mancha com violeta de cristal, a formação clara da chapa foi considerada, quando o grupo contaminado da pilha não tratado com o HEPES não mostrou nenhum sinal da formação da chapa. Não há nenhum efeito cytopathic, e nenhuma formação da chapa. Pode-se ver que HEPES pode obviamente promover a formação de chapa do vírus de raiva em pilhas de BHK.

Observação na sensibilidade do método da chapa de HEPES

O método da chapa de HEPES pode ser usado para o titer da infecção do vírus. As experiências mostram que há um relacionamento óbvio do titer entre o número de chapas formadas após a infecção do vírus e a diluição do vírus. Os titers infecciosos da mesma tensão do vírus de raiva CTN-BHK foram medidos pelo método da chapa de HEPES e pelo método do rato. Os resultados mostraram que o número de chapas obtidas pelo método da chapa de HEPES para 4 determinações consecutivas variou de 1.0×10° a 4.0× 10*PFU/m1. O titer da infecção obtido pelo método do rato para 4 determinações consecutivas é 6.0~6.8log ou 1.0×10°~6.3×10/ml. Isto mostra que o método rápido da chapa de HEPES tem a mesma sensibilidade que o método do rato.

Vantagens do método da chapa de HEPES

Usando a tensão do vírus de raiva CTN-181 e a tensão de CTN-BNK para estudar o método da titulação do titer da infecção, os resultados mostram que HEPES pode induzir e aumentar o efeito patogênico do vírus canino nas pilhas contaminadas. Quando o vírus contamina as pilhas, estão cultivadas em 37°C para 3~5 apenas para adicionar 50~00mmol/L HEPES na tampa do meio semi-contínuo no primeiro dia, mancha do methylcellulose com solução violeta de cristal após 24 horas, e calculam o número de chapas pelos olhos nus após a secagem na temperatura ambiente. Comparado com o método do ponto do inseto relatado na literatura precedente, este método da chapa tem as vantagens de rápido, de simples, de econômico, de sensível e de fácil dominar.

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