Aplicação do ácido ethanesulfonic do hydroxyethylpiperazine 4 (HEPES) na detecção do vírus de raiva

Ácido 4-hidroxietilpiperazina-etanosulfónico, abreviatura em inglêsReservatório HEPES, Número CAS: 7365-45-9, cor é pó cristalino branco, faixa de valores de PH é de 6, 8- 8.2, a sua aplicação mais comum é como um valor de pH de ajuste de amortecimento biológico e a sua aplicação em produtos de cuidados da pele também são amados pelos principais fabricantes.A sua aplicação na detecção do vírus da raiva é muitas vezes desconhecidaHoje, o editor do Desheng vai divulgar conhecimento relevante para todos.

O vírus da raiva geralmente não produz citopática (CPE) quando se reproduz em células infectadas, e não é fácil formar placas em condições de cultura convencionais.Embora muitos estudiosos no país e no estrangeiro tenham estabelecido erosão do vírus da raiva em células embrionárias de frango e células BHK-21. métodos de localização, mas estes métodos exigem condições experimentais rigorosas, ou as operações são complicadas e difíceis de dominar, o que afeta a sua popularização e utilização.Após os investigadores terem descoberto que o ácido 4-hidroxietilpiperazina etanesulfónico HEPES pode aumentar o efeito patogénico do vírus da raiva nas células infectadas, utilizaram esta característica do HEPES para estabelecer um método de placa HEPES simples e rápido para o vírus da raiva.

Efeito do HEPES na formação de placa do vírus da raiva

Após as células infectadas terem sido cultivadas a 37°C durante 3 a 5 dias, as células infectadas tratadas com HEPES desenvolveram alterações citopáticas óbvias na parte inferior da cobertura.Depois de ter sido manchado com um cristal violetaNo grupo de células infectadas não tratadas com HEPES não foram observados sinais de formação de placa, não houve efeito citopático e não houve formação de placa.Pode- se ver que o HEPES pode, obviamente, promover a formação de placa do vírus da raiva nas células BHK..

Observação sobre a sensibilidade do método HEPES da placa

O método da placa HEPES pode ser utilizado para o título da infecção viral.Os experimentos mostram que existe uma relação óbvia de título entre o número de placas formadas após a infecção viral e a diluição do vírusOs títulos infecciosos da mesma estirpe do vírus da raiva CTN-BHK foram medidos pelo método da placa HEPES e pelo método do rato.Os resultados mostraram que o número de placas obtidas pelo método HEPES para 4 determinações consecutivas variava de 1 a 10 por pessoa..0×10° a 4.0×10*PFU/m1. O título de infecção obtido pelo método do rato para 4 determinações consecutivas é 6,0×6,8log ou 1,0×10°6,3×10/ml.Isto mostra que o método da placa HEPES rápida tem a mesma sensibilidade que o método do rato..

Vantagens do método HEPES da placa

Usando a estirpe do vírus da raiva CTN-181 e a estirpe CTN-BNK para estudar o método de titulação do título de infecção,Os resultados mostram que o HEPES pode induzir e reforçar o efeito patogénico do vírus canino nas células infectadasQuando o vírus infecta as células, elas são cultivadas a 37°C durante 3°5 Basta adicionar 50°00mmol/L de HEPES na tampa de meio semi-sólido de metilcelulose no primeiro dia,manchar com solução cristalina violeta após 24 horas, e calcular o número de placas a olho nu após a secagem à temperatura ambiente.Este método de placa tem as vantagens de ser rápido, simples, económico, sensível e fácil de dominar.

O HEPES produzido pela Desheng é de grau reagente com uma pureza superior a 99%.DeshengSe tiver quaisquer dúvidas ou necessidades, pode aceder ao website oficial para consultar o pessoal do serviço ao cliente.