Aplicação do éster da acridina em etiquetar o ácido nucleico

O éster de acridina (nsp-dmae-nhs), pó amarelo, número CAS: 194357-64-7, é um importante reagente de quimioluminescência.As condições de rotulagem doÉster de acridinasão leves, a taxa de rotulagem é elevada e a rotulagem não afeta a separação.

Além disso, o processo de quimioluminescência do éster de acridina é rápido com baixo fundo e pode emitir luz na presença de hidróxido de sódio e peróxido de hidrogênio.Os reagentes de quimioluminescência do éster de acridina têm boa estabilidade e são fáceis de armazenar.

Além da aplicação na imunoassay, o éster de acridina também pode ser usado para rotular sondas de fragmentos de oligonucleotídeos para detecção de genes ou detecção microbiana.Os compostos de ésteres de acridina são adequados para rotulagem de cadeia de DNA para fazer sondas de DNA de quimioluminescência.

Os resultados da investigação médica moderna mostram que muitas doenças como o cancro e doenças genéticas estão relacionadas com mutações no ADN, e muitas doenças infecciosas são causadas por vírus,bactérias ou parasitas no ambienteA análise da sequência específica do ADN do vírus é propícia ao controlo da situação epidémica.A detecção da sequência do ADN e da mutação da base na cadeia é de grande importância no rastreamento genético, diagnóstico e tratamento precoces de doenças genéticas e detecção de genes patogénicos.

Na análise de hibridação de ácidos nucleicos, a preparação de uma sonda específica e sensível é a chave para o sucesso da análise de hibridação de ácidos nucleicos.Os derivados de éster de acridina podem ser diretamente rotulados na sonda de ácido nucleico sem catalisador e o rendimento quântico de luminescência não é afetadoAlém disso, sob certas condições, o éster de acridina rotulado no ADN de cadeia única não híbrida é hidrolizado e destruído,e somente a cadeia dupla formada pela hibridização é protegida Somente o éster de acridina pode produzir quimioluminescência, e todo o processo de hibridação pode ser monitorizado sem separação.

A invenção refere-se a um método de rotulagem de ácido nucleico com éster de acridina, que compreende as seguintes etapas:

(1) As extremidades 5' e 3' da sonda de ADN foram protegidas;

(2) Marcação do éster de acridina: 25 mm de éster de acridina NHS foram dissolvidos em DMSO e 1 m de tampão HEPES (pH = 8,0) foi preparado.5, foi adicionado ao tampão HEPES e reagido a 37 °C durante 1 hora;

(3) Purificado por HPLC. Na etapa (1), a protecção das extremidades 5' e 3' da sonda de ADN inclui especificamente:Utilizando s-etil trifluorotioacetato para proteger 3' end-nh 2.

A tecnologia Desheng tem pesquisado e desenvolvidoreagentes de quimioluminescênciaA acridina é um ester de acridina, que é um ester de acridina, que é um ester de acridina, que é um ester de acridina.Há luminol e isoluminol.A série de ésteres de acridina tem uma elevada eficiência luminosa e pertence à luminescência directa.