Aplicação do tampão biológico BES na cromatografia de filtragem por gel

A cromatografia de filtragem por gel, também conhecida como cromatografia de peneira molecular ou cromatografia de exclusão estérica, é uma tecnologia de separação baseada em diferenças de tamanho molecular.Na investigação da bioquímica e da biologia molecular, a cromatografia por filtragem por gel é amplamente utilizada na separação e purificação de macromoléculas biológicas como proteínas e peptídeos.amortecimento biológicoO BES desempenha um papel indispensável.Reservatório BESem cromatografia por filtragem por gel.

Princípios básicos da cromatografia por filtragem por gel

O princípio da cromatografia de filtragem por gel baseia-se principalmente na difusão e filtragem de moléculas em partículas de gel.moléculas de diferentes tamanhos serão bloqueadas em graus variadosDevido ao seu grande diâmetro, as substâncias macromoleculares não são fáceis de penetrar nos poros das partículas de gel, por isso se movem para baixo ao longo da lacuna entre as partículas de gel.A velocidade de migração é rápida., e o caminho é curto, então eles fluem para fora da coluna cromatográfica primeiro; Além de difusão no espaço entre partículas de gel,pequenas moléculas também podem entrar nos microporos das partículas de gelDurante o movimento descendente, pequenas moléculas difundem-se de uma partícula de gel para o espaço entre as partículas e depois entram noutra partícula de gel.Eles entram constantemente e difundemA velocidade de movimento descendente das pequenas moléculas é inferior à das grandes moléculas, de modo que as grandes moléculas da amostra saem primeiro da coluna cromatográfica,as moléculas médias fluem para fora mais tardeEste fenômeno também é chamado fenômeno da peneira molecular.

Características de amortecimento da BES e seu papel na cromatografia de filtração por gel

O BES, como agente de amortecimento zwitteriónico, possui excelente desempenho de amortecimento e biocompatibilidade. Pode absorver ou liberar prótons (H +) de forma eficaz dentro de uma ampla faixa de pH (geralmente 6,0 ~ 8,5),mantendo assim a estabilidade relativa do pH da soluçãoEsta característica torna o BES um regulador de pH ideal em experimentos bioquímicos.

Na cromatografia por filtragem por gel, o papel principal do BES é manter a estabilidade do valor de pH da solução.Devido ao facto de a função e a actividade de muitas biomoléculas dependerem de ambientes de pH específicos, é crucial manter um valor de pH estável da solução durante os processos de separação e purificação.pode absorver ou liberar prótons para lidar com pequenas mudanças de pH na solução, assegurando assim a estabilidade e a actividade das biomoléculas durante o processo de separação.

Além disso, o BES também pode ajustar a resistência iónica da solução.Ajustando a concentração de BES, a força iónica da solução pode ser controlada, afetando assim a velocidade de elução e a eficiência de separação das proteínas.A força iônica adequada pode melhorar a interação entre as partículas de proteína e gel, prolongam o tempo de elução da proteína e melhoram a eficiência de separação.

Aplicação da BES na cromatografia por filtragem por gel

1. Otimizar as condições de separação

Quando se utiliza cromatografia por filtragem por gel para separar e purificar biomacromoléculas,É necessário selecionar condições de separação adequadas de acordo com as características das moléculas-alvo e as necessidades experimentais.. O BES, como solução tampão, pode otimizar as condições de separação ajustando parâmetros como concentração, valor de pH e resistência iónica.O aumento da concentração de BES e a redução do valor do pH podem melhorar a sua interação com as partículas de gel e melhorar a eficiência de separação.

2Melhorar a pureza da separação

Uma vez que a cromatografia de filtragem por gel é baseada no tamanho molecular, pode haver algumas moléculas de impurezas de tamanho similar às moléculas alvo no processo de separação.Estas moléculas de impurezas podem competir com as moléculas alvo para os locais de adsorção das partículas de gel, afetando assim a pureza da separação. Usando o BES como solução tampão, a resistência iónica e o valor de pH da solução podem ser ajustados,para alterar a interacção entre as moléculas alvo e as moléculas de impurezas e partículas de gel e melhorar a pureza da separação.

3Proteger a estrutura e a função das biomoléculas

No processo de cromatografia por filtragem por gel, a estrutura e a função das biomacromoléculas podem ser afectadas por factores físicos e químicos.Pode proporcionar um ambiente de pH estável e adequado para proteger a estrutura e a função das biomoléculas de serem afetadasAlém disso, o BES também pode ligar-se a alguns íons metálicos para formar complexos de íons metálicos estáveis, evitando assim o efeito destrutivo dos íons metálicos nas biomoléculas.

Conclusão

Em conclusão, o amortecedor biológico BES tem um amplo valor de aplicação na cromatografia de filtragem por gel.As condições de separação podem ser otimizadas, a eficiência e a pureza da separação podem ser melhoradas e a estrutura e a função das biomoléculas podem ser protegidas.

Como fabricante de matérias-primas BES, a Desheng dispõe de tecnologia de produção avançada e de um rigoroso sistema de gestão da qualidade.BESAs matérias-primas produzidas têm uma elevada pureza e uma qualidade estável, o que pode satisfazer a procura dos clientes por produtos de alta qualidade.A Desheng concentra-se na inovação tecnológica e na investigação e desenvolvimento, otimizando continuamente os processos de produção, melhorando o desempenho do produto e reduzindo os custos.