Aplicação de CAPS (CAS 1135-40-6) na experiência da transmembrana da proteína

Introdução

CAPS, 3 (cyclohexylamine) - 1-propanesulfonic ácido, um produto químico orgânico, pó cristalino branco, CAS1135-40-6, é um amortecedor biológico, de uso geral em jogos diagnósticos bioquímicos dos jogos, da extração de DNA/RNA e em diagnóstico do PCR jogos. O amortecedor para a química de enzima e a separação da HPLC de drogas básicas é amplamente utilizado no processo de transferência da membrana de arranjar em sequência dos protei. CAPS protege é composto de CAPS, da água deionized, etc., e seu pH é ajustado a 11,0 para o fibronectin do purificationof.

CAPS protege

Pontos-chave da operação

1. Eletroforese de SDS-PAGE: de acordo com as circunstâncias convencionais (sistema de CAPS: para > = proteína 20kD; Sistema de Tris Tricine: para o ponto baixo - proteína do peso molecular, também para a elevação - proteína do peso molecular);

2. Concentração do metanol: a escala da concentração do metanol no amortecedor electroimprinting de CAPS é 0-20% (a concentração do metanol é alta, usado para o ponto baixo - transferência da proteína do peso molecular; a concentração do metanol é baixa ou mesmo não contém o metanol, usado para a elevação - transferência da proteína do peso molecular);

tratamento da membrana 3.PVDF: remova a membrana de PVDF, embeba-a no metanol por diversos segundos, e põe-na então no amortecedor electroblotting de CAPS. (Nota: a membrana de PVDF será impedida da secagem acima após a operação. Se a membrana está seca, repita a operação desta etapa);

4. Tratamento do gel: remova o gel do gel e embeba-o no amortecedor de CAPS por 5-10 minutos. (Nota: esta etapa pode ser omitida ao transferir algum PI básico forte das proteínas > 9,0);

5. Instale o entalhe de transferência: imerja o papel e a esponja de filtro no eletro amortecedor de mancha, a seguir pressione o sanduíche de impressão bonde na ordem de esponja, de papel de filtro, de filme de PVDF, de gel, de papel de filtro e de esponja, e põe-no em um entalhe giratório bonde pequeno.

6. Condições de transferência: transferência na pressão 50V constante (100-170 miliampère) na temperatura ambiente para 0.5-2h. (Nota: drene as bolhas entre o gel e o filme de PVDF. Por exemplo, a proteína acima de 70 KD deve ser transferida por um tempo mais longo);

7. Pré-tratamento da tingidura da membrana de PVDF: remova a membrana de PVDF e enxágüe-a com água deionized, embeba-a no metanol por diversos segundos, a seguir tinja-a;

8. Tingidura da membrana: Azul brilhante de Coomassie que tinge-se (dissolva 0,1% azuis brilhantes R-250 de Coomassie no ácido acético de 40% methanol/1%) por 30-50 segundos (não mais de 1 minuto), descolorizando com o metanol de 50% (solução de descoloração da mudança frequentemente), lavando com água deionized inteiramente, e secando então;

Preparação de CAPSbuffer

1. 10×CAPS (100mmol/L) a solução de amortecedor é preparada como segue: CAPS, 22.13g; adicione a água deionized a 900ml; ajuste o valor de pH a 11,0 com NaOH 2mol/L (sobre 20ml), a seguir dilua-o a 1L, e armazene-o em 4℃.

2. O amortecedor electroimprinting de CAPS (1×CAPS que contém o metanol de 10%) é preparado pelos seguintes métodos: 200ml 10 do × CAPS; 200ml do metanol; 1600ml da água deionized.

Outras aplicações

CAPS é usado igualmente para fabricar materiais de soldadura, equipamento de condicionamento de ar e matérias primas para fabricar; é usado igualmente para fabricar a pirotecnia; é usado como o reagente analítico, portador da inversão térmica, e igualmente usado na indústria farmacêutica; é usado para o condicionamento de ar, pirotecnia, baterias secas; é usado igualmente como o fluxo e o dessecativo; é usado para o agente de cura do isocyanate aquoso na indústria de pintura. A empresa de Desheng especializa-se no R&D e na produção de vários amortecedores biológicos, incluindo CAPS, Tris, Bicine, ESPANADORES, etc., com ≥ 99% da pureza alta, processo estável, empresas bem-vindas e indivíduos a uma consulta mais adicional.