Aplicação de CAPS (CAS 1135-40-6) na experiência da transmembrana da proteína

Introdução

CAPSO ácido 3- ((ciclohexilamina) 1-propanesulfónico, um produto químico orgânico, pó cristalino branco, CAS1135-40-6, é um amortecedor biológico, comumente utilizado em kits de diagnóstico bioquímico,Kit de extracção de ADN/ARN e kit de diagnóstico por PCRO tampão para química enzimática e separação HPLC de drogas básicas é amplamente utilizado no processo de transferência de membrana de sequenciamento de proteínas.CAPSO amortecedor é composto por:CAPSO pH é ajustado para 11,0 para a purificação da fibronectina.

Reservatório CAPS

Pontos-chave de funcionamento

1. Electrophoresis SDS-PAGE: de acordo com as condições convencionais (sistema CAPS: para proteínas > = 20kD; sistema Tris Tricine: para proteínas de baixo peso molecular, também para proteínas de alto peso molecular);

2. Concentração de metanol: a gama de concentrações de metanol no tampão de eletroimpressão CAPS é de 0-20% (a concentração de metanol é elevada, utilizada para transferência de proteínas de baixo peso molecular;A concentração de metanol é baixa ou não contém metanol, utilizados para a transferência de proteínas de peso molecular elevado);

3Tratamento da membrana de PVDF: retirar a membrana de PVDF, mergulhá-la em metanol durante vários segundos e colocá-la no tampão de electroblotting CAPS (Nota:A membrana PVDF deve ser impedida de secar após o funcionamento.. Se a membrana estiver seca, repetir a operação desta etapa);

4. Tratamento com gel: retirar o gel e mergulhar no tampão CAPS durante 5 a 10 minutos. (Nota: esta etapa pode ser omitida quando se transferem algumas proteínas básicas fortes PI > 9,0);

5. Instalar o slot de transferência: mergulhar o papel filtro e esponja no tampão de electro blotting, em seguida, pressione o sanduíche de impressão elétrica na ordem esponja, papel filtro, filme PVDF, gel,Papel de filtro e esponja, e colocá-lo em uma pequena ranhura elétrica rotativa.

6Condições de transferência: transferência a pressão constante de 50 V (100-170 MA) a temperatura ambiente durante 0,5 a 2 horas.a proteína acima de 70 KD deve ser transferida por mais tempo);

7. Pré-tratamento da tintura da membrana de PVDF: retirar a membrana de PVDF e lavar com água desionizada, mergulhá-la em metanol durante vários segundos e, em seguida, tingir;

8. Tintura por membrana: Tintura azul brilhante Coomassie (dissolver 0,1% de R-250 azul brilhante Coomassie em 40% de metanol/1% de ácido acético) durante 30 a 50 segundos (não mais de 1 minuto),descolorindo com metanol a 50% (troque frequentemente a solução descolorente), lavar completamente com água desionizada e, em seguida, secar;

CAPS preparação de amortecimento

1. 10×CAPS(100 mmol/L) solução tampão é preparada da seguinte forma: CAPS, 22,13 g; adicionar água deionizada a 900 ml; ajustar o valor de pH para 11,0 com 2 mol/L NaOH (cerca de 20 ml), depois diluir para 1 L, e armazenar a 4°C.

2O tampão de eletroimpressão CAPS (1 × CAPS contendo 10% de metanol) é preparado pelos seguintes métodos: 200 ml de 10 × CAPS; 200 ml de metanol; 1600 ml de água deionizada.

Outras aplicações

CAPSÉ igualmente utilizado no fabrico de materiais de solda, equipamento de ar condicionado e matérias-primas para fabrico; é também utilizado no fabrico de produtos pirotécnicos; é utilizado como reagente analítico,transportador de intercâmbio de calor, e também utilizado na indústria farmacêutica; é utilizado para ar condicionado, pirotecnia, baterias secas; é também utilizado como fluxo e como dessecante;é utilizado para o curado de isocianato aquoso na indústria de tintasA empresa Desheng é especializada em I&D e produção de vários tampões biológicos, incluindo CAPS, Tris, Bicine, MOPS, etc., com alta pureza ≥ 99%, processo estável,acolher empresas e indivíduos para uma consulta mais aprofundada.