Immunoassay da quimioluminescência e immunoassay da fluorescência

No domínio do diagnóstico in vitro, os métodos de detecção comumente utilizados são tanto o immunoassay CLIA por quimioluminescência como o IFA por imunofluorescência,e, finalmente, ambos são detectados por um fotômetro, mas os princípios dos dois são essencialmente diferentes.

Em comparação com a radioimunoanálise, a imunonoanálise por fluorescência e a imunonoanálise ligada a enzimas, a imunonoanálise por quimioluminescência tem mais vantagens.forte especificidadeAlém disso, é livre de radiação, o marcador tem um longo período de validade e pode ser totalmente automatizado.

Reagente de quimioluminescência éster de acridínio

A diferença entre imunidade por quimioluminescência e imunidade por fluorescência:

Embora ambos sejam reações de luminescência, a diferença mais intuitiva é que a quimiluminescência é a própria luminescência do reagente,enquanto a fluorescência é irradiada com uma fonte de luz (geralmente ultravioleta) e emite luzO princípio de emissão de luz dos dois é diferente, de modo que os resultados de detecção também serão diferentes.

A quimioluminescência é o uso da energia gerada por uma reação química para induzir transições de nível de energia para emitir luz, como o luminol que detecta manchas de sangue;A fluorescência é um fenômeno fotoluminescente, e uma fonte de luz deve ser fornecida para excitar moléculas para produzir transições de nível de energia e, em seguida, emitir luz.

A quimioluminescência é menos interferente que a imunidade fluorescente:

Quando estes dois métodos são utilizados para a imunoanálise, a diferença é óbvia: a quimioluminescência não requer uma fonte de luz externa e a interferência de fundo é pequena;enquanto a fluorescência requer uma fonte de luz externaQuando detectado na direcção da fonte de luz vertical, a proteína, aminoácidos e outras moléculas na amostra biológica também serão detectados.e o fundo é um pouco mais altoÉ necessário seleccionar reagentes fluorescentes e métodos de tratamento de amostras adequados para reduzir a influência da adsorção não específica das proteínas.

No método direto, o anticorpo de cada antígeno deve ser rotulado fluorescentemente, e o rotulado fluorescentemente pode afetar o título do anticorpo ou até mesmo tornar-se inválido.O método indireto só precisa fazer o anticorpo correspondente ao antígeno correspondenteEle não precisa ser rotulado fluorescentemente para cada anticorpo, e tem pouco efeito sobre o título do anticorpo primário.A interferência da quimioluminescência é muito pequena e a especificidade é muito elevada.A utilização de todo o método é limitada pela não especificidade da própria análise química.O desenvolvimento de materiais de contas magnéticas tornou o desenvolvimento da tecnologia de quimioluminescência cada vez mais maduro.

No desenvolvimento de reagentes de diagnóstico in vitro, a Desheng conseguiu êxito tanto em reagentes de imunodependência ligados a enzimas como em reagentes de quimioluminescência. Luminol e isoluminol são todos os reagentes necessários nos testes imunológicos de quimioluminescência. .