A carcaça do cromogêneo COBRE a determinação de etapas do ácido gordo livre

A determinação do ácido graxo livre (AFA) no soro é um importante índice de ensaio bioquímico, e o AFA está estreitamente relacionado com a saúde humana.Porque os componentes do soro são complexos e há muitos tipos de FFA, a detecção é afetada por muitos fatores, de modo que o substrato cromogênicoTOPSé geralmente utilizado para determinar a FFA.

Reagente TOPS de substrato de cromogénio

Determinação das TOPS do cromogénio FFA:

1No recipiente, adicionar primeiro a solução tampão pesada de acordo com a proporção da fórmula e, em seguida, adicionar ATP, coenzima A, 4- aminoantipirina, ativador iónico (cloreto de magnésio), estabilizador (BSA),e conservante em sequênciaDepois de adicionar a quantidade adequada de água, adicionar o surfactante, ajustar o pH para pH 6-9 com ácido clorídrico concentrado, adicionar acil-CoA sintase finalmente, depois agitar e filtrar,e adicionar água destilada ao filtrado para obter reagente A quantitativamente.

2. Adicionar tampão ao recipiente, adicionar cromogénio TOPS, água, surfactante, por sua vez, ajustar o pH para pH 6-9, finalmente adicionar HRP e acetil CoA oxidase, depois agitar e filtrar,e, em seguida, adicionar água destilada ao filtrado resultante até uma quantidade quantitativa Reagente B é obtido.

3. Preencher os reagentes acima em frascos para injectáveis e conservá-los a 2- 8°C.e ler o valor de absorção A1; adicionar o reagente B e misturar uniformemente, incubar durante um determinado período de tempo e ler o valor de absorção A2.

Preparar tampão:

Em um recipiente de vidro limpo, adicionar primeiro um tampão HEPES (tampão de Good, tampão zwitteriónico, incluindo HEPES, Tris, MES, MOPS, etc.) pesado de acordo com a proporção da fórmula,adicionar a quantidade adequada de água, e depois adicionar o surfactante 5 ml/ L TritonX-100, usar ácido clorídrico concentrado para ajustar o pH para pH 6- 9, a quantidade é de cerca de 5 ml/ L, depois agitar e filtrar,e, em seguida, adicionar água destilada ao filtrado obtido numa quantidade.

O método de utilização dos TOPS comosubstratos cromogênicospara a detecção de FFA sérico ou plasmático tem alta precisão e pequeno erro de medição, e é a cor mais adequada entre os muitos cromógenos de Trinder, que é baixa em acetil CoA, alta em estabilidade,e grande em coeficiente de absorção molarPara além do TOPS, os substratos cromogénicos produzidos pela Desheng incluem o TOOS, o MAOS, o ADPS, etc., adequados para a detecção do açúcar no sangue e de outros indicadores bioquímicos.