O HEPES é o ácido 4-hidroxietil piperazina-etanosulfônico em chinês, o número CAS é 7365-45-9, a faixa de tampão do pH é 6,8-8.2, o valor de pKa é de 7,5 a 25 °C. O HEPES Na é o sal sódico de n - (2-hidroxietil) piperazina-n'(2-ácido etanosulfônico), o seu número CAS é 75277-39-3.Reservatório HEPESO HEPES Na e o HEPES Na são tampões biológicos muito importantes, que são amplamente utilizados em biofarmacêuticos, diagnósticos médicos e outros campos.
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O HEPES é um tipo de tampão anfotérico, que é utilizado no meio de cultura celular e na investigação de proteínas para vários tipos de organismos.Kit de extracção de ADN/ARN e kit de diagnóstico PCRDevido ao seu efeito não tóxico sobre as células e à sua capacidade de controlar o intervalo de pH constante durante muito tempo, o HEPES é frequentemente utilizado como aditivo cosmético, agente ativo,Agente de peeling e promotor através do papel do agente.
Diferença entre HEPES e HEPES Na: O HEPES Na, também conhecido como base HEPES orgânica, é uma relação ácido-base conjugada com o HEPES.mas o pH das duas substâncias após a dissolução é diferente.
Os métodos de preparação do HEPES foram os seguintes:
Sobre a preparação da solução tampão HEPES, de acordo com o uso da preparação, uma é HEPES puro + NaOH, a outra é HEPES + sal.
1、 Preparação de 500 ml de 1 m HEPES, pH = 7.0, solução de base
Dissolver 119,15 g de HEPES em 400 ml de água destilada, adicionar 0,5 a 1 m de solução aquosa de NaOH para ajustar pelo menos o pH necessário (a gama de pH eficaz do HEPES é de 6,8 a 8,2),depois fixar o volume em 500 ml com água destilada e conservar a 4 °C.
2、 Fórmula tampão HEPES com pequena quantidade de sal (500 ml)
HEPES 6,5 g, NaCl 8,0 g, na2hpo 4,7 h2o 0,198 g, ajustar o valor do pH com 0,5 m de solução de NaOH e, finalmente, fixar o volume.
3、 Preparação de solução de sal tampão 2 × HEPES
Dissolver 1,6 g de NaCl, 0,074 g de KCl, 0,027 g de na2hpo4,2 h2o, 0,2 g de dextrano e 1 g de HEPES em 90 ml de água destilada, ajustar ao valor de pH necessário com 0,5 m de NaOH,e depois fixar o volume para 100 ml com água destilada.
O método de preparação do HEPES Na foi o seguinte:
O HEPES Na pode ser sintetizado por 4- hidroxietil piperazina e vinil sulfonato de sódio, ou por síntese a alta pressão de ácido hidroxietil sulfónico, hidróxido de sódio e 4- hidroxietil piperazina.Atualmente, o método de preparação mais utilizado que satisfaz os requisitos dos tampões biológicos é a reação do HEPES com NaOH para produzir HEPES Na. As etapas específicas de preparação são as seguintes:
Sob protecção de nitrogénio, HEPES com pureza entre 90-99% e NaOH sólido ou solução foram reagidos durante 0,2-1 horas a 20-100 °C. Após a reação, o produto obtido foi descolorido,Filtrados, concentrados, desidratados, cristalizados, lavados e secos para obter HEPES Na.
Este método é simples e fácil de operar, e o rendimento e a pureza do produto HEPES Na são elevados, o que pode satisfazer os requisitos de pureza do tampão biológico.
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