Instruções de utilização do tampão HEPES

Ácido 4-hidroxietilpiperazine-etanosulfónico, denominadoHEPES, CAS n.o 7365-45-9, é geralmente utilizado como amortecimento biológico em experimentos bioquímicos.

Propriedades físicas e químicas: HEPES

Fórmula molecular: C8H18N2O4S

Peso molecular: 238.31

Condição: pó cristalino

pKa:7.45-7.65

Faixa de amortecimento: 6,8-8.2

Estrutura:

Purificação: superior a 99%

Concentração de utilização: 10-50 mmol/l

Dependendo da aplicação, os tampões HEPES estão sujeitos a dois sistemas de tampão comumente utilizados:

HEPES solução tampão: HEPES + NaOH (500 mL): 119,15 g HEPES é dissolvido em 400 mL de água destilada, adicionar 0,5 ~ 1 M NaOH solução aquosa para ajustar pelo menos o pH necessário,prestar atenção ao intervalo de pH tampão eficaz é de 6.8-8.2, e depois usar água destilada para fazer o volume para 500mL;

2. HEPES solução salina tamponada: HEPES 6,5 g, NaCl 8,0 g, Na2HPO4·7H2O 0,198 g, ajustar o valor do pH com 0,5 M NaOH solução aquosa, e fazer o volume para 500 ml.

3.2×HEPES solução salina tamponada: dissolver 1,6 g de NaCl, 0,074 g de KCl, 0,027 g de Na2HPO4.2H2O, 0,2 g de glucano ou dextrano e 1 g de HEPES em 90 ml de água destilada,e ajustar para o pH necessário com 0.5M de valor NaOH, depois diluído em 100 ml com água destilada.A solução de cultura de células HA não contém íons de cálcio e magnésio, mas contém BSA.

As vantagens do tampão HEPES:

1Ao contrário do PEcine, o HEPES não contém grupos de coordenação e não pode formar complexos estáveis com a maioria dos íons metálicos.

2O HEPES tem uma solubilidade muito boa em água e a faixa de amortecimento é próxima de neutra.por isso não é adequado para sistemas redox e tem iões relativamente grandesForça, o PIPES é mais ácido.

3. O HEPES não tem efeitos tóxicos e secundários sobre as células em baixa concentração e pode controlar uma faixa de pH constante durante muito tempo.e o meio de cultura geral contém 20 mmol/L de HEPES para atingir a capacidade de amortecimentoPortanto, é comumente usado em solução de HA, solução de cultura celular, solução de preservação de vírus e até mesmo produtos de cuidados com a pele.

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