Nos testes bioquímicos relacionados de preparações de enzima, além do que a medição do índice, da concentração, e da estabilidade dos vários indicadores a ser testados, há igualmente indicadores para detectar a atividade de enzima, tal como o açúcar no sangue, os lipidos do sangue, e a creatinina. Para indicadores tais como a oxidase do transaminase e do sarcosine, a atividade de enzima precisa de ser medida.
Em linhas gerais, a atividade de enzima é a atividade da catálise da enzima, que envolve um parâmetro cinético da enzima- Michaelis quilômetro constante, que significa a concentração da carcaça (s) quando a reação enzimático alcança a metade da velocidade máxima (Vm). A velocidade da reação de enzima não é uniforme, não linear como a concentração, mas o número de medidores em Changshu é constante, que é uma quantidade física característica da enzima. A constante de Michaelis das mudanças da enzima com o tipo medido da carcaça, a temperatura da reação, o pH e a concentração iônica. Sob as mesmas circunstâncias, não importa o que a concentração da enzima é, a concentração da carcaça exigida é a mesma quando a taxa de reação máxima é alcançada.
Método da medida da constante de Michaelis da oxidase do sarcosine:
Prepare uma solução do sarcosine com uma concentração de 1,0, de 2,0, de 3,0, de 4,0, de 5,0, de 6,0, de 7,0, de 8,0, de 9,0, de 10.0mmo1/L com amortecedor Tris-HC1 do pH 8,0, e reaja em 37°C por 5 minutos determinam a atividade inicial da oxidação de SOX em concentrações diferentes do sarcosine. A taxa de reação V e 1/V é obtida. De acordo com o método de traço recíproco do dobro de Lineweaver-Burk, com 1 [s] como a abcissa e 1/V como a ordenada, os quilômetros e o Vmax de SOX ao sarcosine foram calculados.
Conclusão da constante de Michaelis da oxidase do sarcosine:
A constante de Michaelis pode ser usada para julgar a especificidade da enzima. Menor o valor do quilômetro, maior a afinidade entre a enzima e a carcaça, e mais apropriada a carcaça é como a carcaça natural da enzima. De acordo com o teste e o cálculo de oxidase do sarcosine acima, a equação de Michaelis é y=1232.5X+8.7012 e o coeficiente de correlação é 0,9947: os valores calculados do quilômetro e do Vmax de SOX ao sarcosine são 141.6mmol/L e 0.115mmol, respectivamente/(L.min).
Deve-se notar que a oxidase SOX do sarcosine das fontes diferentes tem uma determinada diferença na constante de Michaelis do sarcosine. Por exemplo, o valor do quilômetro de SOX de Corynebaclerium ao sarcosine é 21mmol/L. Desde que a constante de Michaelis não não tem nada fazer com a concentração da enzima e o tipo de enzima, este ponto pode igualmente ser usado para a identificação ou a determinação da enzima. Desheng bioquímico centra-se sobre o campo da detecção bioquímica, e fornece-se uma variedade de preparações de enzima que incluem SOX, a pectase do colesterol, a oxidase de glicose, etc.
