Otimização do método das PARTES SUPERIORES para a determinação de ácidos gordos livres

A determinação de ácidos gordos livres no soro ou no plasma adota geralmente o método fotométrico da enzima do cromogêneo de Trinder. Contudo, devido às características deste teste, a detecção de ácidos gordos é afetada por muitos fatores, e o método de detecção precisa de ser aperfeiçoado e melhorado para melhorar a precisão da detecção.

Princípio da detecção FFA do cromogêneo de Trinder:

O método de detecção tem três etapas da reação: os ácidos gordos livres (FFA ou NEFA) reagem com o CoA adicional para gerar o acílico-CoA sob a ação da sintase acetil-CoA (ACS), e reagem com o oxigênio sob a ação da oxidase acetil-CoA (ACO). A reação gera 2,3 CoA transporte-enoyl e água oxigenada, e a reação de Trinder é usada para detectar a água oxigenada, e o índice de FFA pode ser obtido.

As PARTES SUPERIORES são recomendadas para a determinação de FFA do cromogêneo

Problemas em métodos da determinação e da otimização de FFA:

1. A coenzima excessiva A na reação interferirá com a reação da água oxigenada e do cromogêneo de Trinder, fazendo o ponto baixo inteiro do resultado da análise. N-ethylmaleimide (NEM) pode ser usado para remover a coenzima adicional A. A estabilidade de NEM é muito afetada. Limitado, somente de uma semana.

2. A oxidase do CoA do synthetase e do acetil do CoA do acetil usada tem as especificidades diferentes da carcaça para ácidos gordos livres diferentes, causando diferenças nos resultados da determinação. As fontes de enzima diferentes têm especificidades diferentes da carcaça para ácidos gordos livres com comprimentos de corrente diferentes de C. Isto é, a capacidade da resposta é diferente. Há 6 tipos de FFA no soro humano, e somente as enzimas com especificidade alta a ele podem não fazer nenhuma diferença nos resultados da medida.

3. Devido à influência do CoA na reação, a escala linear dos resultados dos dados é estreita. A cor de FFA mediu no mercado é MEHA, TBHB, TOOS, etc., mas é interferida extremamente pelo CoA, e deve ser excessiva, assim que a interferência é exigida. Menos cromogêneo. SCEP não é interferiu pela coenzima A mas é instável. As DEMORAS e as PARTES SUPERIORES são interferiram menos pelo CoA, e as PARTES SUPERIORES têm um coeficiente de absorção mais alto do molar, assim que é uma carcaça melhor do cromogêneo.

4. Adicione DTNB complexo sulfhydryl e MIT para reduzir a quantidade de NEM. O grupo sulfhydryl de DTNM pode reagir com o grupo sulfhydryl de CoA para remover a interferência ao cromogêneo. Uma pequena quantidade de MIT pode remover o grupo sulfhydryl de CoA e igualmente atua como um preservativo. Baseado no uso do cromogêneo das PARTES SUPERIORES, a interferência do CoA pode completamente ser eliminada, e a estabilidade é melhorada extremamente.

Se você tem umas exigências mais altas para resultados da determinação de FFA, você pode escolher um jogo da melhor qualidade baseado nos pontos acima. Desheng produz as matérias primas para o FFA e outros jogos da determinação do índice. Se as PARTES SUPERIORES são usadas para determinar diretamente FFA, devido à estabilidade pobre da solução, recomenda-se preparar antes de usar uma solução de trabalho para o uso imediato.