Em experiências ou em testes bioquímicos, quase todas as reações precisam de ser controladas dentro de alguma escala do pH, especialmente aquelas que envolvem enzimas. As mudanças de PH têm um impacto maior na reação, assim que os amortecedores biológicos são usados para manter o valor de pH do ambiente da reação. Em experiências bioquímicas, muitas delas simulam a reação da detecção no organismo, que igualmente exige o pH alto. O corpo biológico é regulado por fluido humoral, assim que o amortecedor biológico é precisado na experiência.
Há muitos tipos de amortecedor biológico, e os métodos da preparação são um tanto diferentes, mas o princípio é geralmente o mesmo. O hidróxido de sódio é adicionado geralmente ao ácido conjugado ou o ácido clorídrico é adicionado à base conjugada. Ambos os métodos podem formar uma solução de amortecedor com suficiente concentração de pares conjugados da ácido-base. Está aqui o método da preparação de uma pequena quantidade (sobre 1-2l) de dihydroxyethylglycine Bicine ou do ácido propionic EPPS do hydroxyethylpiperazine:
Preparação do amortecedor de Bicine
(1) solução de 0.1M (a): Água deionized 16.317g/1,000ml de Bicine
(2) solução do NaOH de 0.1m (b): Água deionized 4g/1,000ml do NaOH
(3) o pH 5,1 1000 ml + 0 ml (b) (a) (a): (b) = 5-0
PH 7,8 + 200 ml 1000 ml (a) (b) (a): (b) = 5 a 1
PH 8,2 + 400 ml 1000 ml (a) (b) (a): (b) = 5-2
PH 8,6 + 600 ml 1000 ml (a) (b) (a): (b) = o
PH 10,4 + 800 ml 1000 ml (a) (b) (a): (b) = cinco
Preparação do amortecedor de EPPS
(1) solução de 0.1M (a): Água deionized 25.233g/1,000ml de EPPS
(2) solução do NaOH de 0.1m (b): Água deionized 4g/1,000ml do NaOH
(3) o pH 5,2 1000 ml + 0 ml (b) (a) (a): (b) = 5-0
PH 7,3 + 200 ml 1000 ml (a) (b) (a): (b) = 5 a 1
PH 7,8 + 400 ml 1000 ml (a) (b) (a): (b) = 5-2
PH 8,2 + 600 ml 1000 ml (a) (b) (a): (b) = o
PH 8,8 + 800 ml 1000 ml (a) (b) (a): (b) = cinco
Deve-se notar isso: a temperatura da preparação é controlada em 20 graus. Se o valor de pH exato é precisado, pode ser medido com medidor de pH de A, e então a proporção da solução A e da solução B pode ser ajustada ao valor de pH específico de A. Se é necessário excluir íons do sódio no ambiente de teste, é igualmente possível substituir o hidróxido de sódio com o hidróxido de potássio e mudar o peso de acordo com o peso molecular correspondente.
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