Preparação do amortecedor de Tris (CAS77-86-1) com valor de pH diferente

Tris, não.- tri-hidroxi-metila-aminometanosé um composto orgânico com a fórmula molecular de (hoch2) 3cnh2.Seu grupo amino pode condensar com aldeídos.

Tris, não.é uma base fraca, e o valor de pH da solução aquosa alcalina Tris é de cerca de 10.5Geralmente, o ácido clorídrico é adicionado para ajustar o valor do pH ao valor necessário para obter a solução tampão desse valor de pH. A faixa de tampão eficaz da solução tampão está entre pH 7.0 e 9.2, mas deve-se notar o efeito da temperatura sobre o pKa de Tris.1.

Porque...Tris, não.O buffer é uma solução alcalina fraca, o DNA será desprotonado em tal solução para melhorar a sua solubilidade.que é usado para estabilizar e armazenar ADNSe a solução ácida que regula o valor do pH for substituída por ácido acético, obtém-se "TAS/acetato/EDTA",e "Tris/borato/EDTA" é obtido quando a solução ácida é substituída por ácido bóricoEstes dois tampões são geralmente usados em experimentos de eletroforese de ácidos nucleicos.

Preparação de Tris HCl eTris, não.EDTA:

1、 1mTris HCl(pH 7.4, 7.6, 8.0) para preparar 1000 ml

Método de preparação:

a. Pesar 121,1 g de Tris num copo de 1000 ml.

b. Adicionar cerca de 800 ml de água deionizada e agitar completamente até dissolver.

c. Adicionar HCl concentrado ao quadro seguinte para ajustar o valor de pH necessário.

d. Diluir a solução em 1000 ml.

e. Armazenar à temperatura ambiente após esterilização a alta temperatura e a alta pressão.

Nota: a solução deve ser resfriada até à temperatura ambiente antes de fixar o valor do pH, porque o valor do pH da solução Tris varia muito com a temperatura.O valor de pH da solução será reduzido em cerca de 00,03 unidades por cada aumento de temperatura de 1 °C.

2、 1,5 m Tris HCl (pH 8,8) para preparar 1000 ml

Método de preparação:

a. Pesar 181,7 g de Tris num copo de 1000 ml.

b. Adicionar cerca de 800 ml de água deionizada e agitar completamente até dissolver.

c. Ajustar o valor do pH para 8,8 com HCl concentrado.

d. Diluir a solução em 1000 ml.

e. Armazenar à temperatura ambiente após esterilização a alta temperatura e a alta pressão.

Nota: a solução deve ser resfriada até à temperatura ambiente antes de fixar o valor do pH, porque o valor do pH da solução Tris varia muito com a temperatura.O valor de pH da solução será reduzido em cerca de 00,03 unidades por cada aumento de temperatura de 1 °C.

3、 TE é o tampão Tris EDTA (10 mm Tris, 1 mm EDTA, pH7).4- Não, ph7.6, ph8.0).

10 × tampão TE (pH 7.4, 7.6, 8.0) 100 mm Tris HCl, 10 mm EDTA para preparar 1000 ml

Método de preparação:

a. Medir as seguintes soluções e colocá-las num copo de 1000 ml.

11M Tris-HCl Buffer ((pH7.4,7.6,8.0) 100 ml;

2500 mM EDTA ((pH8.0) 20 ml

b. Adicionar cerca de 800 ml de água deionizada ao copo e misturar uniformemente.

c. Após a fixação da solução em 1000 ml, é esterilizada sob alta temperatura e pressão.

d. Armazenar à temperatura ambiente.

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