Efeito protetor do aminomethane (hydroxymethyl) dos tris em rupturas da costa do ADN

Os danos causados pela radiação ao DNA geralmente ocorrem de duas maneiras: direta e indireta.O efeito indirecto envolve a radiólise da solução em torno do ADN e a subsequente interacção entre o ADN e os produtos da radiólise..

Estima-se que 80% dos efeitos letais da radiação alta LET sejam causados por efeitos directos, pelo que é necessário estudar os danos ao ADN induzidos pela radiação alta LET,que também é útil para esclarecer o mecanismo molecular de alto efeito biológico relativo de alta radiação LET.

TRIS base em pó

No estudo dos danos do ADN causados pela radiação ionizante, é obviamente útil obter resultados experimentais mais precisos e fiáveis para selecionar o sistema de dissolução do ADN adequado.O sistema de dissolução mais comum do ADN é o tampão, e os seus principais componentes são 10 mmol/ L de tris (trimetil aminometano) e 1 mmol/ L de EDTA (ácido tetraacético de etilenodiamina) a pH 8.0Vamos olhar para os princípios principais do estudo.

ADN plasmídico PUC19 dissolvido em água pura, 10 mmol/ LBase Tris, 1 mmol / L de RA e te tampão foi irradiado por um feixe de iões de carbono de 100 keV / p.m. (energia inicial 290 MeV / U).A proporção de várias moléculas de ADN em diferentes soluções foi analisada por eletroforese em gel de agarose, e o número médio de rupturas de cadeia única (SSB) e de rupturas de cadeia dupla (DSB) em cada plásmido foi calculado em doses diferentes.

Verificou- se que o Tris podia proteger significativamente o ADN plasmídico da irradiação de íons pesados de carbono inibindo a produção de SSB e DSB,Enquanto o EDTA pode aumentar a produção de SSB e inibir a formação de DSB.

Eletróforetograma da molécula de ADN pUC19 em solução e dose de irradiação diferentes

Pode-se ver na figura acima que, com o aumento da dose de irradiação, a percentagem de ADN superenrolado no ADN total diminui.O conteúdo de DNA supercolada no Tris e no tampão te diminuiu lentamenteQuando a dose foi aumentada para 150Gy, o teor de ADN superenrolado no Tris e no tampão ainda era superior a 80%, mas o teor de ADN superenrolado no EDTA e na água era inferior a 60%.Os resultados mostraram que o ADN em tri produziu menos rupturas de cadeia do que o da água e do EDTA.

Uma série de resultados mostram que o Tris tem um efeito protetor óbvio contra danos da ruptura da cadeia de ADN induzidos por irradiação de iões de carbono de 100 keV/ L ~ m.O ADN superenrolado existia o tempo todo e mostrava proteção óbvia em comparação com água pura e solução de EDTA.