Notícias da Empresa Diversos fatores que devem ser considerados antes da reação da quimioluminescência
O ensaio de quimioluminescência está a tornar-se cada vez mais popular devido à sua excelente sensibilidade de detecção.LuminolNa análise química, as reações de quimioluminescência são usadas para detectar análytes diretamente covalentemente rotulados com compostos de quimioluminescência.Ativar um rótulo quimioluminescente para uma reação luminescente gera um sinal para a detecção do analitoA vantagem deste método é que é mais simples e claro, e evita a necessidade de etiquetas maiores e relativamente "pegadiças".se se trata de um rótulo enzimático ou de um rótulo directo, e como determinar a intensidade da luz deve ser considerado antes de projetar a reação.
O método comum de gerar quimioluminescência é usar enzimas rotuladas para catalisar a reação de quimioluminescência.Cada etiqueta pode iniciar múltiplas reações de quimioluminescênciaO composto quimioluminiscente é fornecido em excesso como um substrato enzimático para garantir a cinética de saturação.A intensidade da luz é uma função linear da quantidade de enzima marcadaA intensidade, a taxa de emissão de fótons por segundo, é o produto da conversão catalítica do substrato e do tempo de vida do composto luminescente.
O gráfico de distribuição da intensidade/tempo da quimioluminescência inclui um período inicial de subida e a extensão da luminescência até ao plateau ou falso plateau.indica que o substrato está esgotado ou que a enzima está inactivadaA detecção da quimioluminescência produzida por enzimas proporciona uma grande flexibilidade no processo de medição.A intensidade da luz em qualquer ponto do tempo passando pelo ponto alto pode estar relacionada com a quantidade de enzimaSe a velocidade for um problema de medição de tipo de inclinação de ponto único ou de vários pontos, pode-se medir na parte ascendente.não há muitos compostos quimiluminescentes adequadosOs candidatos apropriados devem primeiro ter certas funções para permitir a ligação com outras moléculas.Deve emitir toda a luz no menor tempo possível..
Quando a quimioluminescência é gradualmente emitida ao longo de um período de tempo, a intensidade do sinal (fotões/segundo) diminui,e é melhor determinar o número óptimo de rótulos de quimioluminescência na espécie a detectar com base na experiênciaMesmo que, teoricamente, mais tags deveriam fornecer mais fótons, se as tags estiverem espaçadas muito perto umas das outras, ocorrerá um efeito de apagamento.A área de superfície e o número de grupos deriváveis (geralmente amino ou mercapto grupos) fornecem restrições adicionaisNa prática, até 10 a 20 rótulos podem ser ligados a uma macromolécula.Quanto mais provável for que o rótulo interfira nas suas propriedades de ligação.
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