Recentemente, recebo sempre consultas dos clientes sobreReservatórios do bem, mas muitas vezes até mesmo os próprios clientes não são capazes de expressar os seus produtos exatamente exatamente.Vou apresentar brevemente buffer de Good e a diferença entre PIPES e HEPES em buffer de Good.
Os tampões de Good, também conhecidos como tampões zwitteriônicos, são um tipo de sistema de tampão dedicado à pesquisa em ciências da vida.e não têm efeito inibitório sobre as reacções químicas enzimáticasOs sistemas tampão devem ter as seguintes características:
1O valor de pKa está entre 6 e 8.
2. Alta solubilidade em água;
3Não é fácil penetrar no biofilme;
4. Pouco efeito salino;
5A concentração de iões, a composição da solução e a temperatura têm pouco efeito na dissociação;
6Não há complexos ou precipitações com íons metálicos;
7O amortecedor é quimicamente estável;
8. Pequena absorção de luz na faixa de comprimentos de onda ultravioleta e visível;
9. Facilmente produzir sal de alta pureza.
OReservatório PIPESe o tampão HEPES no tampão de Good são os nossos tampões comumente usados, e eles estão inextricavelmente ligados.Mas também têm as suas funções e vantagens.Depois de compreendermos o amortecedor de Good, vamos dar uma olhada em PIPES e HEPES, vamos lentamente penetrar em seus respectivos campos,Para que possamos ser mais boas escolhas usam suas respectivas características:
Tubos
A faixa de pH tampão é de 6,1-7.5, insolúvel em água e solúvel em solução aquosa de NaOH.e não podem formar complexos estáveis com a maioria dos íons metálicosÉ adequado para tampões em sistemas de solução que contenham íons metálicos.PIPES pode ser aplicado à purificação de tubulina utilizando cromatografia de fosfocelulose, a purificação das proteínas recombinantes de ligação ao GTP ARF1 e ARF2 por filtração por gel, e como tampão para cristalizar a transcetolase da E. coli.não é adequado para utilização em sistemas redoxNa cromatografia por troca catiónica, deve utilizar-se uma baixa concentração de tampão PIPES, porque o PIPES tem uma força iônica relativamente elevada e o seu valor de pKa depende da concentração.
HEPES
A faixa de pH tampão é de 6,8-8.2. É solúvel em água. É um amortecedor de íons de hidrogênio que pode controlar uma faixa de pH constante por um período de tempo mais longo. A concentração final é de 10-50 mmol/L,e o meio de cultura geral contém 20 mmol/L de HEPES para atingir a capacidade de amortecimentoO HEPES não forma complexos estáveis com íons metálicos e, na maioria dos casos, não interfere em processos bioquímicos.na investigação sobre proteínas, PIPES é frequentemente utilizado como uma combinação na cromatografia de troca catiônica Componentes tampão e eluente; tampão de reação, tampão de pré-hibridação,tampão de hibridização para separação e análise de componentes nucleares de ARN; rotulagem 3′-terminal para RNA e T4RNA ligase; utilizada em reagentes de diagnóstico bioquímico No kit, kit de extracção de DNA/RNA e kit de diagnóstico PCR.PIPES é utilizado como amortecedor para fosfato de cálcio e sistemas de formação de precipitados de ADNAlém disso, o HEPES interfere na reacção entre o ADN e as enzimas de restrição,e não é adequado para o método de Lowry para determinar o teor de proteínas.
Pode-se ver que nem o PIPES nem o HEPES podem formar complexos estáveis com íons metálicos, o que é adequado para sistemas de solução contendo íons metálicos.Há também uma certa diferença entre elesEm termos de solubilidade, o PIPES é insolúvel em água, enquantoReservatório HEPESA solubilidade em água é boa; em termos de intervalo de amortecimento, o PIPES é ácido a neutro, e o HEPES é neutro a alcalino.Primeiro temos de os compreender.A Desheng já tem uma vasta experiência no buffer da Good, fornece produtos tecnológicos, ensina como escolher a escolha certa para distinguir o que você precisa.Por que não escolhes uma companhia assim?!
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