A aplicação do amortecedor de HEPES
HEPES (4 (2-Hydroxyethyl) - ácido 1-piperazineethanesulfonic) é um amortecedor zwitterionic, CAS No. 7365-45-9, este amortecedor é usado geralmente em experiências bioquímicas para ajustar o PH do sistema de reação, tal como a solução da preservação do vírus ou a solução da preservação da pilha. Não tem nenhum tóxico em pilhas, e mantém o PH por muito tempo, é aplicado sempre no meio de cultura celular e nos cosméticos.
HEPES é um amortecedor amphoteric não-iônico com boa capacidade de proteção na escala do pH de 7.2-7.4. Sua característica principal é manter um valor de PH relativamente estável no meio de cultura ou na observação da pilha. Sob estes padrões, os tampões de garrafas de cultura celular devem ser apertados firmemente para evitar o carbonato exigido que escapa no ar.
A maneira de preparar o amortecedor de HEPES.
O amortecedor de Hepes pode ser adicionado diretamente no meio de cultura preparado com a concentração exigida, seguida pela esterilização do filtro. Adicione 2,38 gramas de pós de HEPES a cada 1000ml da solução da cultura, ajuste o PH a 7,2 com o 1NNaOH após a dissolução, filtre-o e esterilizar-lo antes de aplicar, neste tempo, a concentração de HEPES é 10mmol/L.
Adicionando o solvente do meio de cultura celular 99ml na solução 1ml conservada em estoque, a concentração de HEPES é igualmente 10mol/L.Below é a maneira de preparar a solução conservada em estoque de HEPES com 1mol/L. Primeiramente, 23.8g de dissolução HEPES em 90ml dobro-destilou a água; Em segundo, ajustando o pH a 7.5-8.0 com NaOH 1N; Em terceiro lugar, compondo a 100ml com o titrant da água; Adiante, filtrando e esterilizando antes do embalado na garrafa 2ml; Enfim armazenado em 4℃ ou em -20℃.
Com ponto de alta temperatura resistente e de derretimento até 200°C, o pó de HEPES não será degradado pela autoclave. De acordo com a literatura relevante, se a solução aquosa de HEPES é exposta à luz ambiental por três horas, a água oxigenada tóxica (H2O2) será gerada. Consequentemente, 2 pontos precisam de ser pagados a atenção a, uma são os HEPES que a solução aquosa deve ser mantida longe da luz de modo a para não afetar os resultados experimentais. Após ser configurado como um solvente, deve ser armazenada no °C 4 e ser usada em um curto período de tempo para melhores resultados. Outro geralmente é colocado em uma sala seca e não pode diretamente ser exposto à luz solar por muito tempo.
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