Substrato cromogénicoMAOSO reagente é um reagente cromogénico de alta sensibilidade comumente utilizado em kits bioquímicos.O TMB é também um reagente de cor comumente utilizadoOs princípios de desenvolvimento de cores dos dois são semelhantes, mas há algumas diferenças.
Reagente trindor MAOS
MAOS: O reagente pertence a um novo tipo de reagente de Trinder. Na presença de peróxido de hidrogénio e peroxidase POD, forma uma quinona laranja ou vermelha muito estável com 4-aminoantipirina (4-AAP).Pode ser acoplado oxidativamente com 3-metilbenzotiazol sulfone hidrazona (MBTH) para formar um corante roxo ou azul muito estávelA absorvência molar da corante acoplada MBTH é 1,5-2 vezes superior à da corante acoplada 4-AA; no entanto, a solução 4-AAP é mais estável do que a solução MBTH, por isso o reagente de Trinder é mais utilizado com 4-AAP.
Reagente TMB: É um substrato cromogénico utilizado nos kits ELISA. O TMB ou TMBZ sob catálise de peroxidase é azul após oxidação por peróxido de hidrogénio,e torna-se amarelo após adição da solução stopO valor de OD foi medido com um leitor de microplacas a um comprimento de onda de 450 nm e a concentração de antígeno foi proporcional ao valor de OD,e a concentração de antígeno na amostra foi calculada desenhando uma curva padrão.
Não precisa ser como cromógenos ADPS, TOOS, MAOS, etc. Ele precisa adicionar outro composto (como 4-AA, MBTH) para reagir para mostrar cor,mas TMBZ precisa reagir em condições ácidas (HCl) para reação de corAlguns testes bioquímicos são mais precisos em condições neutras.e é necessário manter um ambiente neutro para manter a atividade, o que limita a aplicação do TMB.
Como outrosReagentes de trindor, MAOS é um sal sódico altamente solúvel em água da anilina. Quando acoplado com 4-aap, o N da anilina se torna uma dupla ligação C=N,e a posição para é combinada com o grupo amino de 4-AA para formar um C = N duplo A ligação, formando assim uma estrutura quinoneimínica, é semelhante à dupla ligação C=O da p-benzoquinona, e os comprimentos de onda de absorção estão na região da luz visível, resultando em uma reação de cor.
O comprimento de onda de absorção máximo do produto oxidado do MAOS é muito maior do que o dos reagentes coloridos comuns, e o comprimento de onda de absorção do produto UV é bastante alto em 630nm.Se utilizar um produto como o MAOS, o comprimento de onda máximo de absorção do produto está na região ultravioleta e é relativamente elevado,que podem reduzir consideravelmente a interferência de substâncias com comprimentos de onda de absorção semelhantes na amostraPor conseguinte, recomenda-se o uso de MAOS como substrato de desenvolvimento de cor para alguns itens de detecção bioquímica que exigem valores altamente precisos.
Em suma, a diferença entre MAOS e TMB é que o comprimento de onda de absorção do produto de cor é muito maior do que o do TMB. O acoplamento requer a introdução de 4-AAP ou MBTH,que podem ser detectados num ambiente de pH neutroA Desheng produz actualmente 9 novos reagentes Trinder®, incluindo MAOS.