A diferença entre o luminol e o éster do acridinium em aplicações da quimioluminescência

Como todos sabemos, o mercado interno de DIV tem uma demanda crescente por imunossíntese, e vários tipos de imunossíntese estão a surgir.substituiu gradualmente os testes imunológicos ELISADe acordo com o método, a quimioluminescência pode ser dividida em: quimioluminescência direta, quimioluminescência enzimática e eletroquimioluminescência.Luminol Os esteres de acridínio e de acridínio são utilizados na quimioluminescência enzimática e na quimioluminescência direta, respectivamente.Luminole éster de acridínio na quimioluminescência.

I Imunoanálise da enzima quimioluminiscente

O ensaio imunológico com enzimas quimioluminiscentes (CLEIA) é um ensaio imunológico marcado por enzimas que utiliza um agente quimioluminiscente como substrato para uma reação enzimática.Após a amplificação em dois estágios da enzima e da luminescênciaA peroxidase é utilizada como enzima de rotulagem,Luminol é utilizado como substrato luminescente, sendo adicionado um potenciador de luminescência para melhorar a sensibilidade e a estabilidade da luminescência.o substrato luminescente é o fosfato de dioxetano, e o portador de fase sólida são partículas magnéticas.

Quimioluminescência do luminol

II Imunoanálise de quimioluminescência directa

A imunossíntese por quimioluminescência (CLIA) é um tipo de imunossíntese que rotula diretamente antígenos ou anticorpos com agentes de quimioluminescência.Éster de acridínioé um substrato luminescente ideal e pode ser oxidado por peróxido de hidrogénio num ambiente alcalino para emitir luz.

1Pode participar em reacções de quimioluminescência.

2Reagente conjugado estável após acoplamento com antígeno ou anticorpo.

3Após o acoplamento, o efeito quântico e o poder de reação são mantidos.

4. Não deve alterar ou alterar raramente as propriedades físicas e químicas da substância rotulada, em especial a actividade imunológica.

A vantagem deste método é que ele não é afetado pela excitação, dispersão de luz ou diferença de ponto.A figura abaixo mostra esquematicamente o mecanismo de quimioluminescência direta do método sandwichA figura abaixo mostra esquematicamente o mecanismo de quimioluminescência directa do método sandwich.

III Em geral,LuminolOs agentes luminescentes com ester de acridina são os agentes luminescentes comumente utilizados.Luminolé utilizado como um substrato quimioluminescente enzimático em conjunto com a peroxidase do rabanete para quimioluminescência indirecta com um comprimento de onda máximo de 425 nm. As características da reação são:alta sensibilidade e boa estabilidade da enzimaNo entanto, a desvantagem é que o tempo de excitação mais longo resulta numa velocidade relativamente lenta, o que pode obscurecer os locais de reação dos anticorpos durante o processo de rotulagem.A Antu Biology e outros estão a usar este método..

Como marcador luminescente directo, o éster de acridina deve ser realizado em condições alcalinas contendo H₂O₂. O comprimento de onda máximo da emissão de luz é de 430 nm. As características da reação são: o sistema de luminescência é simples e rápido, e a luminescência é concluída em 5 s,e não é necessário nenhum catalisador, mas o éster de acridínio é instável no sal tampão e facilmente hidrolizado.

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