A diferença entre o amortecedor de Tris e o amortecedor de fosfato

Os amortecedores biológicos são usados frequentemente em experiências bioquímicas da pesquisa e são do significado extremamente importante. São um tipo do líquido de acondicionamento que possa resistir a influência de uma pequena quantidade de ácido e de alcaloide fortes da parte externa e manter o valor de pH basicamente inalterado. Entre os amortecedores biológicos de uso geral é a solução, solução de amortecedor de Tris de amortecedor de PBS, amortecedor de CAPS, ESFREGA o amortecedor, BATE o amortecedor e o amortecedor de EPPS. Este artigo comparará e introduzirá a solução a mais de uso geral de solução de amortecedor de Tris e de amortecedor de PBS de diversos aspectos.

1. Escala de amortecedor

Tris é uma base fraca com uma fórmula molecular de C4H11NO3, um peso molecular de 121,14, e um pKa de 8,1 em 25 °C. A escala de amortecedor eficaz de seu amortecedor está entre o pH 7,0 e 9,2. Os valores de pH de uso geral em experiências bioquímicas são 6,8, 7,4, 8,0, e 8,8. Tris é amplamente utilizado na preparação dos amortecedores em experiências da bioquímica e da biologia molecular, e tem mesmo uma tendência exceder amortecedores de fosfato.

Fosfate salino protegido (PBS) é uma solução de sal com fosfato como o amortecedor do pH e cloreto de sódio como o equilíbrio da pressão osmótico. De uso geral são o amortecedor de fosfato do sódio e o amortecedor de fosfato do potássio. Devido a sua dissociação secundária e a uma vasta gama de valores de pH de proteção, são as soluções de amortecedor as mais amplamente utilizadas na pesquisa bioquímica.

2. Método da configuração

Há duas maneiras de preparar o amortecedor Tris-HCl: prepare soluções de Tris e de HCl separadamente, e então a mistura de acordo com os volumes alistados na tabela comum. Contudo, porque a concentração padrão de ácido clorídrico diluído não é fácil de preparar, um outro método é de uso geral: Tome a configuração do amortecedor Tris-HCl como um exemplo: primeiramente dissolva a base de Tris na água mL~970 deionized 950 mL, adicione o HCl gota a gota ao agitar, e use o medidor de pH mede o valor de pH da solução ao valor de pH exigido, e adiciona-lhe então a água.

O método da preparação da solução de amortecedor do fosfato: Pese o NaCl, o KCl, o KH2PO4 e o K2HPO4, dissolva-os em 800 mL da água destilada, ajuste-o o pH da solução a 7,4 com HCl, e adicione-o finalmente a água destilada para fazer o volume a 1 L. Pode ser armazenado em um refrigerador no ℃ 4. Deve-se notar que a concentração usual refere a concentração de todos os fosfatos na solução de amortecedor, não a concentração de Na+ ou K+. Na+ e K+ são usados somente para ajustar a pressão osmótico. O sal do potássio é melhor do que o sal do sódio ao configurar a solução de amortecedor do fosfato. O sal do sódio não é fácil de dissolver-se na baixa temperatura, quando o sal do potássio tiver uma solubilidade relativamente mais alta.

3. Campo do uso

A solução de amortecedor de Tris forma um sistema do amortecedor com glicina no amortecedor da eletroforese para estabilizar o pH; o sistema do amortecedor Tris-HCl é usado no gel para estabilizar o pH; é amplamente utilizado como um solvente para ácidos nucleicos e proteínas; a baixa concentração iônica do amortecedor de Tris é igualmente ele pode ser usada para formar as fibras intermediárias dos nemátodo; adicione o EDTA ao amortecedor do ácido clorídrico de Tris para fazer de “o amortecedor TE”, que pode ser usado para a estabilização e o armazenamento do ADN; mude a solução ácida deajuste ao ácido acético para obter de “o amortecedor TAE”, mudança ao ácido bórico para obter o amortecedor de TBE. Estes dois amortecedores são usados frequentemente em experiências ácidas nucleicas da eletroforese.

As preparações biológicas geralmente ativas da solução de amortecedor do fosfato devem ser diluídas com a solução de amortecedor do fosfato. A razão é que tem um equilíbrio de sal e um efeito de proteção que possam ajustar o valor de pH apropriado. A água destilada não tem nenhum efeito do equilíbrio de sal, que destruirá a estrutura e as propriedades biológicas de proteínas biológicas; salino fisiológico não tem o efeito de ajustar o pH, e não pode assegurar-se de que participe em reações biológicas sob condições ótimas para substâncias completas e ativas, assim que o uso de PBS está preferido. Naturalmente, PBS não é uma panaceia. Algumas substâncias biologicamente ativas exigem circunstâncias relativamente altas, e mais ingredientes precisam de ser adicionados ao amortecedor do equilíbrio para manter as melhores circunstâncias para assegurar-se de que as substâncias biologicamente ativas para manter suas a maioria de características completas. Consequentemente, PBS é usado principalmente para experiências da pilha, e sua escala de amortecedor é a mais apropriada para o ponto morto.

Na experiência bioquímica, a solução de amortecedor deve com cuidado ser selecionada, não somente a escala de amortecedor da solução de amortecedor, mas igualmente o ambiente do uso da solução de amortecedor deve ser considerado detalhadamente. Os materiais novos de Hubei Desheng têm-se especializado na produção e no desenvolvimento de amortecedores biológicos por muitos anos. Desheng tem uma equipe independente do R&D e tem uma riqueza da experiência prática durante o desenvolvimento de produtos e a produção. Presentemente, os amortecedores biológicos e outros produtos produzidos por Desheng foram vendidos a muitos países em todo o mundo, e repurchased com elogio, e alcançaram a cooperação a longo prazo com muitos clientes estrangeiros. Se você está interessado na compreensão, você pode chamar para a consulta. Desheng dá boas-vindas a suas chamadas.