HEPESé um tipo de amortecedor anfóterico de íons de hidrogénio com boa capacidade de amortecimento e longo tempo para manter o pH constante. É amplamente utilizado em amortecedor de reação de ácidos nucleicos,tampão de hibridação e meio de cultura celularDe acordo com as suas características, há algumas diferenças na configuração do tampão em diferentes experimentos.
Propriedades físicas e químicas deHEPES
Ácido 2-[4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinyl]etanosulfônico
Número CAS: 7365-45-9
Fórmula molecular: C8H18N2O4S
Peso molecular: 238.3
Faixa de amortecimento: 6,8-8.2
Estrutura molecular:
HEPESLiquor-mãe (estoque tampão): preparar directamente 0,5-1mHEPESNaOH pode ser substituído por KOH, se necessário.
HEPES solução de sal tampão: adicionar uma pequena quantidade de cloreto de sódio e fosfato de hidrogénio dinódico na solução HEPES, adicionar a solução aquosa de NaOH, ajustar o pH,Adicionar água destilada para volume constante, e conservar a baixa temperatura.
HEPESMeio de cultura celular: adicionar uma pequena quantidade de cloreto de sódio, cloreto de potássio, fosfato de hidrogénio dinódico, dextrano, etc. à solução aquosa de HEPES, e depois ajustar o pH com a solução de NaOH,e, finalmente, armazenar a um volume constante e baixa temperaturaNos experimentos de adesão celular, os íons cálcio e magnésio são geralmente adicionados ao meio de cultura HEPES para proteger a caderina das células e não afetar a formação da agregação celular.
Solução de HA:HEPES- O meio de cultura celular BSA, que é um dos componentes do meio de cultura celular, não contém íons de cálcio e magnésio e contém alguns outros íons de sal.Após o tratamento das bactérias de filtração, é principalmente adequado para limpeza e cultura em cultura primária de células de tecido.
A diferença de aplicação de HEPESA Desheng desenvolveu e produziu um tampão em diferentes experiências.Porque não tem efeito tóxico nas células., não só mantém o pH, mas também aumenta o tempo de sobrevivência in vitro das células hospedeiras do vírus após a amostragem, mantém a integridade do ácido nucleico e da proteína do vírus na maior medida possível,e melhora a precisão de detecção.