O papel importante de meios do transporte da amostra do RNA de sal do guanidine na detecção do ácido nucleico

O medo causado coronário novo da pneumonia em 2020, reivindicado não somente as vidas de muitos povos, mas igualmente interrompido o ritmo da vida. Devido a uma epidemia, o GDP de China despencou, e a economia tem retornado diretamente a uma década há. Mesmo que a epidemia esteja relativamente sob o controle, os peritos não podem garantir que foi completamente controlado, e fará mesmo um retorno. Os testes ácidos nucleicos são atualmente o método principal do diagnóstico e do controle da pneumonia coronária nova. Contudo, os testes ácidos nucleicos igualmente encontram problemas infinitos. Por exemplo, os resultados da análise são um grande número falsos negativos. Para este problema, o meio do transporte da amostra do RNA fornece a grande ajuda.

Meios do transporte do vírus (neutralizados e não-neutralizados)

Antes de extrair o ácido nucleico da amostra, o meio comum do transporte da amostra precisa de pôr a amostra em um ambiente acima de 56°C para neutralizar o vírus. Este processo da inativação protege indubitavelmente os pessoais na inspeção da exposição do vírus, mas igualmente destrói a integridade do ácido nucleico viral, fazendo com que algumas amostras não sejam detectadas normalmente, que é uma das razões para a taxa alta do falso negativo.

O aquecimento de alta temperatura aumentará a degradação do RNA e reduzirá a quantidade de detecção da amostra. Usar meios do transporte do RNA pode eficazmente inibir a degradação do RNA. Em relação à preservação depois que a amostra do vírus está recolhida, por exemplo, depois que o cotonete pharyngeal está provado, a amostra é empacotada e posta então no tubo de amostra. Não todos os tubos de amostra estéreis podem ser usados para armazenar vírus, um meio do transporte da amostra do RNA são exigidos pelo menos para salvar. Para o armazenamento do vírus, os meios não-neutralizados do transporte do vírus são usados geralmente.

Os componentes dos meios não-neutralizados do transporte do vírus são: Hanks fundação líquida, gentamicina, antibióticos fungosos, amortecedor de BSA (v), cryoprotectant, biológicos e ácidos aminados. A combinação de antibióticos múltiplos tem efeitos anti-bacterianos e antifungosos. A albumina de soro bovino (BSA) como um estabilizador da proteína pode formar uma película protetora no escudo da proteína do vírus, fazendo o difícil decompor e assegurar a integridade do vírus. O ambiente neutro construído por ajudas do amortecedor dos Hanks aumenta a época de sobrevivência do vírus e a estabilidade da infecção. Sua vantagem é que pode eficazmente preservar a atividade do vírus. É conveniente para o isolamento e o cultivo subsequentes do vírus, mas os locais são que devem ser armazenados em uma baixa temperatura.

O RNA é degradado facilmente, e o RNase é simplesmente o inimigo natural da extração do RNA. O RNase tem uma vasta gama de fontes e pode incluir vários organismos na natureza. Consequentemente, é difícil garantir que o RNase não estará misturado nas amostras que você recolhe. O RNase igualmente degrada o RNA na temperatura ambiente, assim que nós precisamos de armazenar amostras em 4° (a curto prazo) ou em -70° (termo meio-longo). Se nós queremos armazenar por muito tempo o vírus do RNA, nós precisamos de usar o nitrogênio líquido. Em muitos casos, a experiência da extração exige o lysis rápido da amostra após a recuperação, e mesmo a operação na lata de gelo reduz a taxa de degradação do RNA. Se há poucas amostras virais do RNA recolhidas na amostra original, transformar-se-á menos após um período de degradação do RNase. Depois que a temperatura é aquecida a 56°, a atividade da enzima aumenta. Em 92°, a enzima não será desnaturada, mas a eficiência será melhorada mais. Então o fenômeno da degradação será mais sério.

Há alguma maneira de salvar o vírus sem ser dividida pelo RNase? A resposta é o meio do transporte do vírus do RNA de sal do guanidine, que é o meio do transporte da inativação do vírus.

Os sais do Guanidine incluem geralmente o hidrocloro do guanidine, nitrato do guanidine, o cyanoguanidine e semelhante, que pode eficazmente desnaturar proteínas. O RNase é igualmente um protease que seja desnaturado e perca seu papel original. O escudo do vírus é feito igualmente da proteína, assim que o sal do guanidine pode igualmente neutralizar o vírus. O processo do aquecimento 56° pode ser omitido.

Os meios do transporte da inativação do vírus podem neutralizar vírus e reduzir a infectividade de amostras do vírus, quando eliminar o processo de aquecimento de alta temperatura melhorar extremamente a precisão da detecção do ácido nucleico. Desde a epidemia, Desheng tem trabalhado duramente para desenvolver meios do transporte do vírus para facilitar a detecção do ácido nucleico. Os meios do transporte do vírus de Desheng são neutralizados e não-neutralizados, e os cotonetes nasais e pharyngeal estão igualmente disponíveis.