O papel do tampão biológico MOPS na análise eletroforética

Em experimentos de biologia molecular, a análise por eletroforese é a tecnologia principal para separar e identificar biomoléculas como ácidos nucleicos e proteínas.A escolha do amortecedor afeta directamente a precisão e a fiabilidade dos resultados experimentais, eMOPS(3- (N-morfolino) ácido propanesulfónico) é um amortecedor que apresenta vantagens significativas na análise eletroforética devido às suas propriedades químicas e estabilidade únicas.

Propriedades químicas e mecanismo de amortecimento do MOPS

O MOPS é um composto orgânico que contém grupos de ácido sulfónico e um anel de morfolina, com um valor de pKa de 7,2 e um intervalo de amortecimento eficaz de pH 6,5-7.9Este intervalo é próximo do valor de pH fisiológico, o que confere ao MOPS uma vantagem natural na simulação do ambiente biológico na investigação.O mecanismo de amortecimento do MOPS mantém a estabilidade da solução em uma ampla faixa de pH através de reações de protonação e de protonaçãoA sua força iônica moderada assegura a uniformidade do campo elétrico e reduz as interacções não específicas, proporcionando um ambiente de migração ideal para as biomoléculas.

As principais vantagens do MOPS na análise eletroforética

1Proteger a solução tampão MOPS de biomoléculas para manter um ambiente de pH estável durante a eletroforese,prevenção eficaz da degradação ou desnaturação do ARN e das proteínas devido a alterações de ácido-baseEm comparação com os agentes tampão tradicionais, o MOPS pode reduzir significativamente a reação de hidrólise dos ácidos nucleicos e manter a conformação natural das proteínas.Os experimentos mostraram que a eletroforese de RNA usando tampão MOPS melhora a clareza da banda em cerca de 30% em comparação com tampão TAE.

2. Melhorar a eficiência de separação. As propriedades alcalinas fracas (pH 7,0-7,5) do MOPS proporcionam distribuição uniforme de carga para biomoléculas e promovem a sua migração eficaz num campo elétrico.Em eletroforese de proteínas, a propriedade de baixa viscosidade do MOPS reduz a difusão da amostra em cerca de 25% e melhora significativamente a resolução.O MOPS apresenta maior simetria de pico ao separar proteínas menores que 15 kDa.

3. Compatibilidade com várias cenas O tampão MOPS é compatível com gel de agarose, gel de poliacrilamida e outros sistemas de eletroforese.MOPS como um tampão transmembrana pode reduzir a ligação não específica do RNA à membrana e melhorar a eficiência da hibridaçãoA sua característica de interferência não fluorescente dá-lhe uma vantagem na eletroforese de fluorescência.

Comparação entre MOPS e outros agentes tampão

1. TAE tampão: TAE tem fraca capacidade de tampão, mas é fácil de preparar e econômico, adequado para análise eletroforética de grandes fragmentos de DNA molecular.

2. TBE tampão: Tem alta capacidade de tampão e é adequado para a separação de fragmentos de ADN de moléculas pequenas, mas pode levar à degradação do RNA na eletroforese do RNA.

Conclusão

O tampão MOPS está a tornar-se uma ferramenta importante no campo da análise eletroforética devido às suas vantagens únicas.O MOPS desempenhará um papel fundamental em mais domínios e promoverá o desenvolvimento inovador da biotecnologiaSeja em pesquisa básica ou aplicações industriais, o MOPS é conhecido por seu desempenho estável e excelente.O MOPS pode fornecer uma estabilidade de pH confiável, ajudando os investigadores a obter resultados experimentais precisos e reproduzíveis.

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