Método de utilização e preparação do agente tampão biológico PIPES em pó

Reservatório biológicoTubosO pó é um reagente químico amplamente utilizado em experimentos biológicos e o seu nome completo é ácido piperazina-1,4-dietanosulfônico.A solução de PIPES desempenha um papel importante na manutenção da estabilidade do ambiente intracelular e na proteção das células contra as flutuações do pHEste artigo fornecerá uma introdução detalhada das propriedades, utilizações e métodos de preparação do agente biológico tampão PIPES em pó.

O PIPES é um reagente químico em pó branco com fórmula química C8H12N2O4S e peso molecular de 248.26É um agente de amortecimento zwitteriónico com capacidade de amortecimento de pH estável, capaz de manter um certo valor de pH em ambientes ácidos ou alcalinos.PIPES também tem alta resistência iónica e baixa permeabilidade, tornando-se amplamente utilizado em experimentos biológicos, como cultura celular, eletroforese e imunoblotting.

Aplicação de PIPES de amortecimento biológico em experimentos biológicos

O pó de PIPES, como amortecimento biológico, tem sido amplamente utilizado em muitas experiências biológicas.

1. Cultura celular: Em experimentos de cultura celular, o PIPES pode servir como tampão de pH para manter a estabilidade do pH do meio de cultura e garantir o crescimento e a divisão celulares normais.Pode servir como um portador de íons para facilitar a troca de íons dentro e fora da célula, afectando as funções fisiológicas da célula.

2. Electrophoresis: Em experimentos de eletroforese, o pó PIPES pode ser usado como peneira molecular e trocador de íons para melhorar a resolução e a eficácia do experimento.em experimentos de eletroforese de proteínas, os PIPES podem ligar-se às proteínas, diminuindo o seu movimento num campo elétrico, melhorando assim a resolução do experimento

3. Imunoblotting: no experimento de imunoblotting, o PIPES pode ser usado como o principal componente do tampão transmembrane para ajudar a transferir proteínas do gel para a membrana.PIPES também pode servir como um portador de íons para melhorar a sensibilidade e especificidade dos experimentos.

4Purificação de proteínas de microtúbulos: em experimentos de purificação de proteínas de microtúbulos,PIPES pode servir como o principal componente do tampão para ajudar na extração e purificação de proteínas de microtúbulos de tecidosPode também inibir a reacção de polimerização das proteínas dos microtúbulos e melhorar a eficiência de purificação.

5Localização do peroxisoma: Em experimentos de localização do peroxisoma, o PIPES pode servir como o principal componente do tampão para ajudar na localização ultrastrutural dos peroxisomas nas células.Também pode proteger as células dos danos causados pelos peroxisomas.

Além das áreas de aplicação acima mencionadas, o PIPES pode também ser aplicado em experimentos biológicos, tais como a separação e purificação de ácidos nucleicos e proteínas, cristalização de proteínas,Em resumo, como um importante tampão biológico, desempenha um papel indispensável em muitas experiências biológicas.

Método de preparação do tampão biológico PIPES

1Prepare os reagentes e equipamentos necessários.

Pulverizador de tubos, água ultrapura, frasco de vidro, papel de pesagem, balança eletrónica, agitador magnético ou oscilador de vórtice.

2. Pesagem de pó de tubos

Pesar com precisão o pó de PIPES utilizando uma balança electrónica com base na concentração e no volume necessários.7 g de PIPES em pó devem ser pesados.

3Dissolver o pó de PIPES

Adicionar o pó PIPES pesado a um frasco de vidro, adicionar uma quantidade adequada de água ultrapura e, em seguida, agitar com um agitador magnético ou um oscilador de vórtice até se dissolver.Observe que deve ser utilizada água ultrapura suficiente para assegurar a dissolução completa.

4Filtragem e esterilização

Filtrar e esterilizar a solução preparada de PIPES para remover as impurezas e bactérias da solução.

5Armazenagem e Utilização

Armazenar a solução filtrada de PIPES num frasco de vidro limpo e em frigorífico a 4 °C.deve ser adicionada uma quantidade adequada de solução de PIPES de acordo com os requisitos experimentais.

Precauções para a utilização de PIPES de amortecimento biológico

1. O pó de tubos tem higroscopicidade, pelo que deve ser armazenado num ambiente seco para evitar a humidade;

2Durante o processo de configuração, deve ser utilizada água ultrapura ou água desionizada para assegurar a pureza e qualidade da solução;

3A solução preparada de PIPES deve ser um líquido incolor e transparente. Se ocorrer turbidez ou precipitação, pode ser devido à dissolução incompleta do pó ou à presença de impurezas.e deve ser reconfigurado;

4A solução preparada deve ser consumida no prazo especificado para evitar a armazenagem prolongada que possa afectar a qualidade e a eficácia da solução.

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