A Tris é um amortecedor zwitteriónico, usado frequentemente em experimentos de biologia e pesquisa científica, é claro, há também muitos usados diretamente na medicina e na indústria.Então, quais são os usos específicos dos diferentes tampões de tris, como utilizar os tampões de tris, e compreender as características de tris e diferentes biotecnologias, como a eletroforese ou cromatografia.
Informações básicasBase TRIS:
Número CAS: 77-86-1
Peso molecular: 121,14 g / mol
Fórmula: C 4 H 11 NO 3
Faixa de pH disponível: 7,2-9.0
pKa (25°C): 8.06
Comprimento de onda máximo (λmax) λ: 260 nm Amax: 0.10: λ: 280 nm Amax: 0.08
Para que é recomendado o TRIS?
LComumente utilizado no tampão de eletroforese em gel (TAE ou TBE)
lUsualmente utilizado para preparar tampão de Laemmli (usado para desnaturação e carregamento de amostras de proteínas no SDS-PAGE)
Cromatografia de troca de íons
Usado para avaliar a endotoxina bacteriana
Para a eletrocromatografia capilar (ECA), devido à sua baixa mobilidade iónica
Usado para complexar metais
Pode ser utilizado para corrigir a acidose
Quais questões devem ser consideradas antes de escolher o TRIS para investigação?
Não é muito eficaz abaixo de pH 7.5
u Tem aminas primárias potencialmente reativas e pode geralmente ser utilizado como inibidor.
Tende a permear a membrana, pelo que não é adequado para a maioria dos trabalhos de cultura celular.
uTóxico para muitas células de mamíferos
uNão é adequado para análise de ácido bicinconínico (BCA)
Pode interferir com o método de ligação do corante de Bradford para determinação de proteínas
O cálcio e outros metais essenciais são bem conhecidos.
uO pH da solução que contém Tris é muito dependente da temperatura, pelo que é muito importante preparar o tampão Tris à temperatura de utilização.
Pode interagir com o sistema tampão bicarbonato/CO2
De acordo com a utilização das diferentes indústrias, as considerações são diferentes e os requisitos para o nível de tris também serão diferentes,a pureza e alguns outros indicadores também serão relativamente diferentes, e estes fatores exigem muitas vezes compradores e fabricantes para ser capaz de aprofundar a comunicação pode ser melhor fornecido.
Dicas sobre o TRIS:
ØAlta solubilidade em solventes orgânicos
ØReage com várias enzimas e inibe várias enzimas
Ø Pode inactivar o popular inibidor da RNase DEPC