O tampão HEPES é o ácido 2- (4- (2-hidroxietil) piperazina) etanosulfônico, CAS 7365-45-9. Este tampão é geralmente utilizado em experimentos bioquímicos para ajustar o valor de pH do sistema de reação,como solução de conservação de vírus ou solução de conservação de células.
Existem dois tipos deReservatório HEPESA concentração da solução de HEPES é de 10 a 50 mmol/ L e a capacidade tampão pode ser alcançada quando o meio de cultura contém 20 mmol/ L de HEPES.Além disso,, este tipo de tampão tem muitas vantagens em relação ao tampão de fosfato. É não tóxico para as células e pode controlar a faixa de pH constante por um longo tempo. É um bom tampão de íons de hidrogênio.
Hepes em pó
A constante de dissociação do amortecedor HEPES é de 7,65 (a 20 °C) e o intervalo de pH do amortecedor é de 6,6-8.6, que é geralmente adequado para o sistema de reação com pH 6,8-8.2Pode ser utilizado directamente com hidróxido de sódio, ou misturado com sal e ajustado o pH com hidróxido de sódio.
1、 500 ml de 1 mol/ L de HEPES, pH 7.0, solução de base: pesar 0,5 mol (119,15 g) de ácido hidroxietil piperazina-etanosulfônico, e depois ajustar para o valor de pH exigido com 0,5 m ~ 1 M de hidróxido de sódio,Finalmente fixar o volume com água destilada, e selar a 4 °C.
2、 HEPES tampão 500 ml com uma pequena quantidade de sal: HEPES > 6,5 g, NaCl > 8,0 g, na2hpo4,7 h2o > 0,198 g, ajustar o valor do pH com 0,5 m NaOH > solução aquosa, finalmente fixar o volume e armazenar a baixa temperatura.
3、 Preparação de 2 × HEPES solução de sal tampão: 1,6 g de NaCl, 0,074 g de KCl, 0,027 g de na2hpo4,2 h2o, 0,2 g de glucano ou dextrano e 1 g de HEPES foram dissolvidos em 90 ml de água destilada,ajustado ao valor de pH exigido com 0.5m NaOH, e depois diluído em 100 ml com água destilada.
Embora o sistema tampão do HEPES não seja tão extenso como o do PBS, apresenta mais vantagens: a resistência iónica do PBS é superior à do HEPES,e a resistência iónica afetará a solubilidade de outros solutos na solução misturadaEm geral, quando o PBS pode ser utilizado, o HEPES pode ser utilizado, mas quando o HEPES é utilizado, o PBS não pode ser substituído.
O tampão HEPES é semelhante ao tubo, mas a solubilidade em água do tubo é pobre, por isso pode ser transformado em sal de sódio do tubo.que, se necessário, podem também ser preparadas em soluções tampão prontas para uso com concentrações específicas.
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