A imunologia quimiluminescente (CLIA) é uma técnica de imunologia altamente sensível e específica amplamente utilizada no diagnóstico clínico, triagem de drogas e pesquisa científica.um composto de 3-aminobenzoilhidrazina, é um dos medicamentos mais utilizadosAgentes quimioluminiscentesQuando se utiliza luminol para o ensaio imunológico por quimioluminescência, a precisão e a fiabilidade do experimento exigem a observância de uma série de rigorosos procedimentos operacionais e precauções.
1、 Propriedades e Armazenamento do Luminol
O luminol, como substância fotossensível, é extremamente sensível à luz e à umidade.preferencialmente num recipiente fechadoVerificar regularmente a pureza e a actividade do luminol para assegurar que está em boas condições para manter a eficiência da reacção de quimioluminescência.
2、 Optimização da reação de quimioluminescência
A reação de quimioluminescência do luminol depende da presença de um oxidante, tipicamente usando peróxido de hidrogênio (H 2 O 2) como oxidante,e requer uma enzima catalítica como a peroxidase do rabanete (HRP) para promover a reação de luminescênciaNa fase de concepção experimental, é necessário regular cuidadosamente o valor do pH, a temperatura e a concentração do reagente no sistema de reação para alcançar uma eficiência de luminescência óptima.Além disso,, determinados potenciadores, como o vermelho bromofenol, demonstraram aumentar significativamente a intensidade de luminescência do luminol e podem ser adicionados de forma adequada de acordo com as necessidades específicas.
3、 Evitar a ligação não específica
No ensaio imunológico por quimioluminescência, a ligação não específica pode conduzir a um aumento do sinal de fundo, afetando assim a precisão dos resultados de detecção.Otimizar a proporção de anticorpos e antígenos, e a adoção de medidas de lavagem rigorosas pode reduzir a ligação não específica, reduzir o ruído de fundo e melhorar a relação sinal/ruído da detecção.
4、 Operação segura e protecção pessoal
O luminol e as suas soluções apresentam um certo grau de acidez e irritabilidade.e luvas devem ser usadas para evitar o contacto directo com a pele e os olhosEnquanto isso, garantir uma boa ventilação no laboratório para reduzir o acúmulo de gases nocivos.
5、 Calibração dos instrumentos e condições de ensaio
Antes de efectuar a detecção da quimioluminescência, é necessário assegurar que o instrumento de detecção foi calibrado e que componentes como a fonte luminosa, o detector,e o filtro estão em ótimas condições de funcionamentoAjustar a sensibilidade e a selecção de comprimento de onda do detector para se adaptar às propriedades luminescentes do luminol, normalmente com o comprimento de onda máximo de emissão em torno de 425 nm.
6、 Estabelecer uma curva padrão
A fim de analisar quantitativamente as moléculas alvo numa amostra, deve ser estabelecida uma curva padrão utilizando um padrão de concentração conhecido.Este processo requer a preparação precisa de amostras padrão e alta repetibilidade das operações experimentais para garantir a gama linear e precisão da curva padrão.
7、 Repetibilidade dos experimentos e do tratamento dos dados
A repetibilidade é um indicador chave para a avaliação da qualidade da imunologia por quimioluminescência.Cada experimento deve incluir um grupo de controlo e várias amostras paralelas para verificar a consistência dos resultados.No tratamento dos dados, devem ser utilizados métodos estatísticos para analisar, eliminar valores atípicos, calcular a média e o desvio-padrão e assegurar a fiabilidade e a ciência dos resultados.
A aplicação do luminol no ensaio imunológico por quimioluminescência não requer apenas que os experimentadores tenham sólidos conhecimentos profissionais,Mas também requer habilidades experimentais elevadas e uma gestão experimental meticulosa. Only by fully considering and strictly adhering to the above precautions can we fully leverage the advantages of luminol in chemiluminescence immunoassay and achieve efficient and accurate detection resultsNa futura investigação científica e na prática clínica,LuminolA Comissão propõe que a Comissão e os Estados-Membros desenvolvam um programa de investigação e de desenvolvimento tecnológico que permita a investigação e desenvolvimento tecnológico e que permita a investigação e desenvolvimento tecnológico.A Desheng tem uma gama completa de tipos de luminol, alta sensibilidade, e pessoal profissional para acompanhar e orientar, ajudando a resolver problemas técnicos.
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