O intervalo de amortecimento de Tris é de cerca de 6-8, o que é adequado para a maioria dos experimentos bioquímicos, especialmente nos experimentos de investigação relacionados com proteínas e ácidos nucleicos;Reservatório EPPSO experimento de pesquisa é mais caro do que o Tris, então qual é adequado para o método Folin fenol para detectar o experimento de proteína?
O método do reagente folin-fenol é um método básico comumente utilizado para determinar a concentração de proteínas e tem sido amplamente utilizado no campo da bioquímica.O EPPS (HEPPS) é normalmente utilizado como tampão para o método Folin fenol para detectar o teor de proteínaEm vez de usar o tampão da Tris.
O tampão Tris e o EPPS são utilizados para a detecção do teor de proteínas
O princípio de coloração do método do fenol Folin para a determinação do teor de proteínas é o mesmo do método do biuret (mas o EPPS não pode ser utilizado para a detecção de biuret/biuret).A diferença é que o segundo reagentePara aumentar a quantidade de cor, melhorando assim a sensibilidade de detecção de proteínas.A vantagem do método Folin fenol para a detecção do teor de proteínas é que tem uma elevada sensibilidade e é muito mais sensível que o método biuret.Claro, também tem algumas desvantagens que leva muito tempo, a curva padrão não é reta, a especificidade é pobre, e há mais substâncias interferentes.
Qualquer grupo que interfira na reação de biuret, tais como -CO-NH2, -CH2-NH2, CS-NH2 e tampão Tris, sacarose, sulfato de amónio e compostos sulfhydryl,pode interferir na reação folina-fenol e afetar esta última muito maisAlém disso, os fenóis e o ácido cítrico também interferem nesta reacção.
O reagente de folina-fenol consiste em dois reagentes, sendo o primeiro o carbonato de sódio, o hidróxido de sódio, o sulfato de cobre e o tartrato de sódio de potássio.A ligação peptídica na proteína reage com a solução de tartarato de cobre de sódio e potássio em condições alcalinas para formar um complexo vermelho-púrpuraO segundo reagente é composto por ácido fosfomolibdico, ácido fosfotungstico, ácido sulfúrico, bromo, etc.Este reagente é facilmente reduzido pelo grupo fenólico da tirosina na proteína para dar uma reação azulEste método também é adequado para determinar o teor de tirosina e triptofano.O intervalo de medição deste método é de 25-250 μg de proteína..
Em resumo, a vantagem do método Folin fenol para determinar o teor de proteínas é a elevada sensibilidade, mas a desvantagem é que demora muito tempo e interfere.A Tris também pode causar interferências.Desheng produz ambas as substâncias.tampões biológicos, não para dizer qual é o melhor, mas para ser adequado para diferentes estudos experimentais.
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