Que amortecedor Tris ou EPPS é apropriado para que o método do fenol do Folin detecte a proteína?

A escala de amortecedor de Tris é aproximadamente 6-8, que é apropriado para a maioria de experiências bioquímicas, especialmente nas experiências relacionadas da pesquisa da proteína e do ácido nucleico; EPPS é igualmente apropriado para a proteína e o ácido nucleico. A experiência da pesquisa é mais cara do que Tris, assim que qual é apropriado para que o método do fenol do Folin detecte a experiência da proteína?

O método do reagente do Folin-fenol é um método básico de uso geral para determinar a concentração da proteína e foi amplamente utilizado no campo da bioquímica. Em aplicações práticas, EPPS (HEPPS) é usado geralmente como um amortecedor para que o método do fenol do Folin detecte o índice de proteína, um pouco do que usando o amortecedor de Tris.

O amortecedor Tris e EPPS é usado para a detecção do índice de proteína

O princípio colorindo do método do fenol do Folin para a determinação do índice de proteína é o mesmo que aquele do método do biureto (mas de EPPS não pode ser usado para o biureto/detecção do biureto). A diferença é que o segundo reagente, o reagente do Folin-fenol, está adicionado. A fim aumentar a quantidade de cor, melhorando desse modo a sensibilidade de detectar proteínas. A vantagem do método do fenol do Folin para detectar o índice de proteína é que tem a sensibilidade alta e é muito mais sensível do que o método do biureto. Naturalmente, igualmente tem algumas desvantagens que toma uns muitos tempos, a curva padrão não é reta, a especificidade é pobre, e há mais substâncias de interferência.

Qualquer grupo que interferir com a reação do biureto, tal como - CO-NH2, - o amortecedor de CH2-NH2, de CS-NH2 e de Tris, a sacarina, o sulfato do amônio, e compostos sulfhydryl, pode interferir com a reação do Folin-fenol e afetar os últimos muito mais grandes. Além, fenóis e ácido cítrico igualmente para interferir com esta reação.

o reagente do Folin-fenol consiste em dois reagentes. O reagente um consiste no carbonato de sódio, no hidróxido de sódio, no sulfato de cobre e no tartrate de sódio de potássio. A ligação de peptide na proteína reage com a solução do tartrate do cobre do sódio do potássio sob circunstâncias alcalinas para formar um complexo roxo-vermelho. O segundo reagente é composto do ácido phosphomolybdic, ácido phosphotungstic, ácido sulfúrico, bromo e assim por diante. Sob circunstâncias alcalinas, este reagente é reduzido facilmente pelo grupo fenólico de tirosina na proteína para dar uma reação azul, e sua profundidade de cor é proporcional ao índice de proteína. Este método é igualmente apropriado para determinar o índice da tirosina e do triptofano. A escala da medida deste método é a proteína 25-250μg.

Em resumo, a vantagem do método do fenol do Folin para determinar o índice de proteína é sensibilidade alta, mas a desvantagem é que toma uns muitos tempos e interfere. Tris pode igualmente causar a interferência. O amortecedor de EPPS deve ser usado. Desheng produz ambos amortecedores, para não dizer qual é melhor, mas para ser apropriado para estudos experimentais diferentes.