Você deve conhecer este conhecimento sobre o trypsin suíno

O que é trypsin

O Trypsin (C6H15O12P3) é um tipo do protease. Nos animais vertebrados, funciona como uma enzima digestiva. No pâncreas, é sintetizado como um precursor da enzima trypsinogen. É segregado como um componente do suco pancreático e decomposto no trypsin ativado sob a limitação do enterokinase ou do trypsin. É um endopeptidase que possa cortar o lado carboxyl de resíduos da lisina e da arginina na corrente do polipeptídeo. Funciona não somente como uma enzima digestiva, mas igualmente limita a decomposição dos precursores de outras enzimas tais como o chymotrypsinogen, o carboxypeptidase, e o phospholipase, e tem um efeito de ativação. É o protease o mais específico, e transformou-se uma ferramenta indispensável em determinar a sequência de ácido aminado de uma proteína.

Introdução de trypsin suíno

A massa molecular relativa de trypsinogen suíno é aproximadamente 24 000. De acordo com a diferença no ponto isoelétrico, trypsinogen suíno pode ser dividido em aniônico (pl6.8<6>). Porque o tipo cationic tem não somente uma gravidade específica maior, mas igualmente tem a melhor estabilidade do que o tipo aniônico, o trypsinogen suíno cationic foi selecionado para a construção e a expressão. Trypsinogen suíno contém 12 cysteines, que podem formar 6 pares de ligações de bissulfeto (30-160, 48-64, 132-233, 139-206, 171-185, 196-220), que aumentaram extremamente a dificuldade da desnaturação e o renaturation de corpos de inclusão em experiências subsequentes.

Aplicação do trypsin suíno

O trypsin suíno é um tipo do trypsin, que possa ser usado como um aditivo para a remoção das pilhas aderentes de superfície, a produção de vacinas do virus da gripe, insulina e outras proteínas, a hidrólise rápida das proteínas, e o pré-tratamento das pilhas e dos tecidos animais. Há uma grande procura para o trypsin com pureza alta e atividade forte. Presentemente, um processo da preparação de trypsinogen suíno de recombinação foi estabelecido, e o trypsin suíno de recombinação obtido tem a boa atividade de enzima e não contém a outra poluição animal da fonte, que fornece uma determinada base experimental para a pesquisa e a produção industrializadas.

Características do trypsin suíno

O trypsin suíno é instável na natureza e na autólise inclinada. Ao construir um sistema trypsinogen suíno de recombinação da expressão, esta característica da autólise faz difícil para que o sistema eucariótica da expressão obtenha trypsinogen completo, e o produto ativado afetarão o anfitrião. As pilhas podem igualmente ser tóxicas, assim que considere escolher um sistema prokaryotic da expressão. Além, as características da autólise exigem que as condições da ativação de trypsinogen suíno também precisar de ser controlado restritamente.

Método da preparação do trypsin suíno

No método tradicional da preparação, há muito etapas da separação e da purificação e uns muitos tempos, que sejam fáceis causar dano à proteína e à inativação da causa. Tendo por resultado o baixo rendimento. Consequentemente, a preparação e a produção de trypsin suíno deslocaram gradualmente da extração do pâncreas animal à produção de recombinação da expressão. A produção de trypsin construindo um sistema trypsinogen-derivado suíno de recombinação da expressão de Escherichia Coli pode igualmente evitar o risco de contaminação relacionada do micróbio patogênico e o risco de levar os vírus desconhecidos devido à origem animal do doador.