Reacção catalítica e princípio de detecção da glutamato-desidrogenase GLDH

Glutamato desidrogenase(GLDH) ou GDH é uma enzima relacionada ao metabolismo de aminoácidos in vivo, presente nos tecidos do fígado, cérebro e rins, e é comumente usada como um indicador de detecção para doenças hepáticas.O GLDH pode catalisar a desidrogenação do ácido L-glutâmico para produzir ácido alfa-cetoglutárico, que entra no ciclo do ácido tricarboxílico.

O ácido glutâmico é um aminoácido ácido com dois grupos carboxilo em sua molécula.Participa em muitas reações químicas importantes em animaisO ácido glutâmico (ácido 2-aminoglutárico) tem três isômeros, o isômero esquerdo, o isômero direito e o isômero racémico.e a glutamato-desidrogenase capaz de desidrogenação (desaminação oxidativa) é o ácido L-glutâmico.

Glutamato desidrogenase

A glutamato desidrogenase está presente principalmente nas mitocôndrias das células do fígado, do coração e dos rins, com pequenas quantidades encontradas nas mitocôndrias do cérebro, músculo esquelético e glóbulos brancos.Além de catalisar a reação reversível da desidrogenação do ácido L-glutâmico, também tem a função de catalisar outros aminoácidos, como catalisar a oxidação da L-valina, L-2-aminobutírico ácido, e L-leucina desaminação.

Princípio de detecção da GDH da glutamato-desidrogenase:

O princípio de detecção da atividade da GLDH da desidrogenase do glutamato e a equação de reação do produto acabado:α - cetoglutarato α - cetoglutarato+NH3+NADH+H+ é catalisado pela glutamato desidrogenase para gerar glutamato GLDH+NAD++H2O NADHReagente: Um tampão de 0,1 M Tris HCl, pH 8,3 B 1,5 M solução de NH4Cl C 0,225 M α - solução de ácido cetoglutárico (pH 7,0-9,0) D 7,5 mM solução de NADH E Diluente enzimático: 0,1 M tampão de Tris HCl, pH 8.3O consumo de NADH pode ser detectado medindo a absorção de luz a 340nm. Tempo de medição: 180s Tempo de atraso: 60s Tempo de integração: 120s Coeficiente/fator: 6.776 Temperatura de medição:30 ± 1 °C 3.2 Preparação da amostra Se a amostra a ensaiar for sólida, pode ser dissolvida numa proporção de 10 mg de amostra/1000ul de água ultrapura.

A glutamato- desidrogenase é uma enzima muito importante no fígado, envolvida no metabolismo do glutamato, alfa- cetoglutarato e outros aminoácidos.a detecção do teor sérico de GDH é um indicador importante de se o organismo está saudávelA preparação da enzima GDH fornecida pela Desheng é a matéria-prima do kit de reagente, utilizada principalmente para detecção bioquímica e experiências de investigação relacionadas.

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