CAS 1135-40-6 CAPS Ácido Propanesulfónico de Ciclohexilamina para experimentos de amortecimento

Breve introdução

Do ponto de vista da estrutura molecular, o CAPS é um ácido sulfúmico substituído por ciclohexano N com um peso molecular de 221,32 e é anfotérico.É um amortecedor biológico muito bom com um intervalo de pH de 9.7-11.1É geralmente usado para experimentos WB. Amparo para membrana de transferência de proteína PVDF ou membrana de transferência de nitrocelulose NC.

Reservatório CAPS

WB significa Western Blot Protein Immunoblotting Experiment.e obter a expressão de proteínas específicas nas células ou tecidos analisados, analisando a posição e a profundidade da coloraçãoInformações. As notas experimentais são as seguintes:

1. Electrophoresis SDS-PAGE: semelhante ao método de hibridação de ácidos nucleicos, exceto que o detectado é a proteína, a sonda é o anticorpo e o anticorpo secundário colorido é rotulado.Em geral., o sistema tampão de Tri-glicerina ou Tris-Tricina é usado para proteínas de baixo peso molecular, e o sistema tampão CAPS é melhor para proteínas de alto peso molecular.A glicina no amortecedor afetará a sequência., então o buffer de transferência usado para o sequenciamento é 10mM/1CAPS10% metanol. A concentração de metanol no buffer de eletroimpressão CAPS é de 0-20%.um tampão com uma elevada concentração de metanol tem um bom efeito de transferência para proteínas de baixo peso molecular, enquanto um amortecedor com baixa concentração de metanol ou mesmo sem metanol é bom para proteínas de alto peso molecular.

2Quando a membrana PVDF for processada, mergulhe-a em metanol durante alguns segundos e coloque-a em tampão de eletroimpressão CAPS.Se a membrana do PVDF ficar seca, repita os passos anteriores. O gel de eletroforese também precisa ser mergulhado no tampão CAPS por 5-10 minutos. Algumas proteínas fortemente básicas não precisam deste passo.

3As condições de transferência são geralmente de 50 V de tensão constante, 100-170 mA de intensidade de corrente e transferência de impressão elétrica à temperatura ambiente..Para proteínas com maior peso molecular, prestar atenção ao prolongamento do tempo de transferência.

Embalagem do produto

4Antes de tingir, a membrana PVDF precisa ser retirada e enxaguada com água desionizada, mergulhada em metanol, depois tingida com 0,1% de azul brilhante Coomassie por 30-50 segundos, descolorida com 50% de metanol,Lavados com água desionizada e secos.

O que precede apresenta algumas questões que necessitam de atenção no experimento de impressão de proteínas.Por favor, use roupas de laboratório e luvas descartáveis para a operação.Recomenda-se que o tampão de eletroimpressão CAPS seja produzido por: DeshengA configuração do ácido propanesulfónico de ciclohexilamina de alta qualidade.