99,5% o fenol saturado Tris formulou a cor CAS.77-86-1 branca

Tris, não. O fenol saturado é um líquido transparente amarelo claro, a camada inferior é a fase fenol e a camada superior é o tampão de ácido clorídrico Tris pH> 7.8É um fenol redestilado saturado com Tris-HCl (pH 8.0). Tem um odor pungente e contém o antioxidante 8-hidroxiquinolina.

Configuração do fenol saturado Tris: Retirar o fenol redestilado da geladeira, colocá-lo à temperatura ambiente e derreter num banho de água a 68 °C.Não o coloque imediatamente num banho de água a 68°C para evitar que o copo estoure.Adicionar 8-hidroxiquinolina a 0,1% e β-mercaptoetanol a 0,2% (solução básica 14,4MOL/ml), misturar bem, a solução torna- se amarela,derramar num funil de separação (também pode ser realizado num copo), adicionar 1MOL/ML Tris (PH8.0) de outros solventes, repetir Depois de misturar, deixar ficar imóvel até se separar; liberar o líquido fenólico amarelo inferior, descartar a camada superior,adicionar Tris sólido cerca de 1 g/100 ml, agitar bem, remover a fase de água, adicionar 0,1 MOL/ml de Tris (PH8.0) para equilibrar várias vezes, até ao pH 8.0, 0,1MOL/ ml Tris (PH8. 0), armazenados num frasco castanho a 4 graus.

Lisato de tecido, certifique-se de que o pH é de cerca de 8,0 (adicionar 0,1 volume de 1M Tris-HCl, pH 8.0, ajuste- a para cerca de 8, 0), e adicione 0,5 volume de fenol saturado de Tris (deixe de lado durante a utilização, retire a fase inferior do fenol.A camada superior é uma solução de Tris-HCl para evitar que o fenol entre em contacto com o ar e retardar a oxidação do fenol), 0, 5 volume de cloroformo: álcool isoamil (24:1), agitar durante 10 segundos e, em seguida, banho de gelo durante 15 minutos.tomar a fase de água (camada superior) e adicionar um volume igual de isopropanol para precipitar o DNA, enxaguar com 75% de etanol e dissolver numa quantidade adequada de TE para posterior utilização.

O fenol saturado Tris tem geralmente um pH superior a 7,8 e é usado para extração de DNA.que podem desnaturalizar e precipitar proteínas em células ou tecidosA principal função do Tris é prevenir e parar a oxidação dos fenóis. Se os fenóis forem oxidados, quinonas (dois anéis de benzeno) serão formados. Contém fortes radicais livres,que podem danificar a estrutura dos ácidos nucleicosAo mesmo tempo, uma vez que o valor do pH é superior a 7, o ADN está na fase aquosa e o ARN na fase orgânica num ambiente alcalino,para que o supernatante seja separado e o DNA possa ser obtido.

O Tris Balanced Phenol é altamente corrosivo, por isso evite o contacto com a pele ou a inalação.

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