Amortecedor ácido do método 1,4-Piperazinediethanesulfonic da preparação

Um método de alta eficiência para a preparação de tampão de ácido 1,4-piperazinedietanosulfónico

Ácido dietanosulfónico piperazina PIPES tem uma variedade de sistemas tampão,entre as quais a solução tampão Transformation Buffer (também chamada de solução TB) pode ser utilizada para preparar células competentes de elevada eficiência.

Competent state refers to a special physiological state in which cells (or bacteria) can take up DNA molecules from the surrounding environment and are not easily broken down by restriction endonucleases in the cellAlgumas bactérias são naturalmente competentes, como o Bacillus subtilis, e algumas são artificialmente competentes, como a Escherichia coli.Tratar as células receptoras com um método especial pode mudar a permeabilidade da membrana celular, tornando-se uma célula competente que permite que as moléculas transportadoras com DNA estranho passem.

Matéria-prima competente para a solução de tuberculose - PIPES em pó

Preparação de tampão de transformação:

A transformação de células bacterianas competentes utiliza o método do cloreto de cálcio.37 graus durante a noite até que uma única colónia cresça.Escolha uma colónia com um diâmetro de 1-3 mm para inocular o meio SOB num frasco Erlenmeyer de 250 ml/3L ou 80 ml/1L. Incubação a 18 graus a 150-250 RPM durante 19-50h.Parar a cultura quando a DO600 estiver em torno de 0.4-0.8, arrefecer em água gelada a 4 graus durante 10 minutos, centrifugar a 300 RPM durante 15 minutos, recuperar as bactérias após a remoção do supernatante, suspender em 1/3 de volume de solução de tuberculose gelada,e centrifugar novamente por 10 minutos para recuperar as bactériasSuspender com 1/12,5 vol. de TB, adicionar DMSO com uma concentração final de 7%, refrescar durante 10 minutos em aliquotas de 0,1-1 ml e conservar directamente em nitrogénio líquido ou a - 80°C.

Na solução de tuberculose de Escherichia coli em suspensão, os principais componentes incluem o tampão PIPES e cloreto de cálcio para transformar as células em competentes.Deve notar-se que este método é adequado para E. coli que não contêm plasmídeos, e não é adequado para plasmídeos grandes. A eficiência de transformação pode ser reduzida após a crioconservação.A DO600 ótima de diferentes estirpes bacterianas também é diferente, e deve ser ajustado de acordo com diferentes experiências.

Existem muitos métodos para preparar células competentes para a tuberculose, e a eficiência dos diferentes métodos pode ser diferente, e as estirpes ou tipos de células aplicáveis também podem ser diferentes.O PIPES produzido pela Desheng é um reagente em pó, e soluções competentes de TB podem ser preparadas de acordo com diferentes necessidades.

A Desheng Biochemical é um fabricante especializado na produção de tampões biológicos na China.Ácido 4- ((2-hidroxietilo)-1-piperazine-etanosulfónico, ácido 3-ciclohexilaminopropanesulfónico, etc., todos com uma pureza superior a 99%, se necessário amigos de negócios de você pode entrar em contato conosco!