CAS 5625-37-6 boas soluções de amortecedor CONDUZ o ácido de Piperazine-1,4-Diethanesulfonic

O nome completo do tampão PIPES é ácido piperazina-1,4- dietansulfónico, uma substância que pode manter o pH da solução dentro de um certo intervalo.Quando uma certa quantidade de ácido e álcali é adicionada a algumas soluções, tem o efeito de impedir a mudança de pH da solução, que é chamada de amortecimentoamortecimento biológicoA solução é chamada de solução tampão. PIPES é um membro importante do tampão de Goods.que não participa nem interfere em processos bioquímicos.
 
Informações básicas
 

 
Aplicação dos PIPES
 
Não pode formar complexos estáveis com a maioria dos íons metálicos e é adequado para amortecimento em sistemas de solução contendo íons metálicos.Foi aplicado à purificação da tubulina utilizando cromatografia de fosfato de celuloseAs proteínas recombinantes de ligação ao GTP purificadas ARF1 e ARF2 foram purificadas por filtração por gel e utilizadas como tampão para cristalizar a cetoenzima da E. coli.porque os PIPES podem formar radicais livres, não é adequado para o sistema redox.Devem ser utilizadas soluções tampão de baixa concentração de PIPES na cromatografia por troca catiónica, uma vez que o PIPES tem uma resistência iónica relativamente elevada e o seu valor de pKa é dependente da concentração..
 

Reservatório PIPES
 
Vantagem dos PIPES
 
A pureza (> 99%) é solúvel em água, o processo é estável e a aparência do produto pode ser garantida como um pó cristalino branco puro.
 
Ácido dietanosulfónico piperazina PIPES tem uma variedade de sistemas tampão,entre as quais a solução tampão Transformation Buffer (também chamada de solução TB) pode ser utilizada para preparar células competentes de elevada eficiência.
Competent state refers to a special physiological state in which cells (or bacteria) can take up DNA molecules from the surrounding environment and are not easily broken down by restriction endonucleases in the cellAlgumas bactérias são naturalmente competentes, como o Bacillus subtilis, e algumas são artificialmente competentes, como a Escherichia coli.Tratar as células receptoras com um método especial pode mudar a permeabilidade da membrana celular, tornando-se uma célula competente que permite que as moléculas transportadoras com DNA estranho passem.
Preparação de tampão de transformação:
 

A transformação de células bacterianas competentes utiliza o método do cloreto de cálcio.37 graus durante a noite até que uma única colónia cresça.Escolha uma colónia com um diâmetro de 1-3 mm para inocular o meio SOB num frasco Erlenmeyer de 250 ml/3L ou 80 ml/1L. Incubação a 18 graus a 150-250 RPM durante 19-50h.Parar a cultura quando a DO600 estiver em torno de 0.4-0.8, arrefecer em água gelada a 4 graus durante 10 minutos, centrifugar a 300 RPM durante 15 minutos, recuperar as bactérias após a remoção do supernatante, suspender em 1/3 de volume de solução de tuberculose gelada,e centrifugar novamente por 10 minutos para recuperar as bactériasSuspender com 1/12,5 vol. de TB, adicionar DMSO com uma concentração final de 7%, refrescar durante 10 minutos em aliquotas de 0,1-1 ml e conservar directamente em nitrogénio líquido ou a - 80°C.
 

Embalagem do produto
Na solução de tuberculose de Escherichia coli em suspensão, os principais componentes incluem o tampão PIPES e cloreto de cálcio para transformar as células em competentes.Deve notar-se que este método é adequado para E. coli que não contêm plasmídeos, e não é adequado para plasmídeos grandes. A eficiência de transformação pode ser reduzida após a crioconservação.A DO600 ótima de diferentes estirpes bacterianas também é diferente, e deve ser ajustado de acordo com diferentes experiências.
Existem muitos métodos para preparar células competentes com tuberculose, e a eficácia dos diferentes métodos pode ser diferente, e as cepas ou tipos de células aplicáveis também podem ser diferentes.Reservatório PIPESO reagente utilizado na produção de Desheng é um reagente em pó, e soluções competentes de TB podem ser preparadas de acordo com as diferentes necessidades.