Explorando os Mistérios do Biobúffer de Alta Pureza HEPES CAS 7365-45-9

A lactato desidrogenase (LDH), como uma das enzimas- chave na via de glicólise intracelular, sofre alterações na sua actividade em várias condições patológicas.A medição precisa da actividade da LDH não é apenas de grande importância para a investigação científica básicaA escolha do amortecedor adequado é um dos factores-chave para garantir a exactidão dos resultados dos testes durante este processo.

Ácido hidroxietil piperazina-etanosulfônico (Reservatório HEPES), como amortecimento biológico amplamente utilizado, está gradualmente a tornar-se o componente central dos kits de detecção da lactato-desidrogenase.Este artigo irá analisar em detalhe o papel fundamental do HEPES na detecção da lactato desidrogenase a partir de múltiplas perspectivas, incluindo a sua importância e aplicação na detecção de LDH.

HEPES em pó

A importância do HEPES na detecção da lactato desidrogenase

A reação redox entre lactato e piruvato catalisada por LDH requer uma faixa de pH específica para exibir atividade ideal.a actividade da enzima pode diminuir ou mesmo ser completamente perdidaPor conseguinte, a adição de agentes tampão ao sistema de detecção da lactato desidrogenase é um passo fundamental para garantir a precisão da detecção.

O HEPES desempenha um papel crucial nos kits de detecção da lactato desidrogenase devido ao seu excelente desempenho de amortecimento.Esta é uma reação reversível., e quando a concentração de ácido láctico é elevada, promove a reação inversa, isto é, a síntese de ácido pirúvico a partir de ácido láctico.,O ácido L-láctico reage com o NAD+ para produzir ácido pirúvico e NADH. O NADH apresenta absorção característica em um comprimento de onda de 340nm,o que significa que a actividade da LDH pode ser quantificada através do controlo das alterações na absorçãoPor conseguinte, o HEPES não só mantém a estabilidade do pH do sistema de reação, mas também fornece uma garantia para a determinação precisa do teor de lactato desidrogenase.

Aplicação do HEPES no kit de detecção da lactato-desidrogenase

O kit de reagentes utilizado para a detecção da lactato-desidrogenase consiste geralmente em reagentes independentes I e II.

No reagente I, o HEPES atua como tampão biológico e forma um sistema de reação com complexos de íons metálicos, substratos de LDH, surfactantes, ativadores de enzimas LDH, conservantes e água.O HEPES é responsável principalmente pela manutenção da estabilidade do pH do sistema de reação e pelo fornecimento de um ambiente de reação adequado para o substrato da lactato desidrogenaseAo mesmo tempo, interage com complexos de íons metálicos para assegurar que os íons metálicos (como os íons de zinco na lactato desidrogenase) estejam em estado químico estável,mantendo a conformação activa da enzimaAlém disso, os surfactantes, activadores enzimáticos e outros componentes podem promover melhor as reações no ambiente de pH estável criado pelo HEPES.

No reagente II, o HEPES também existe e funciona em conjunto com o estado de oxidação do nicotinamida adenina dinucleótido (NAD +), surfactantes, conservantes e água.como coenzima em reacções catalisadas pela lactato-desidrogenase, é altamente sensível ao pH nas reações redox em que participa.O HEPES pode garantir que o NAD + sinergize com a lactato desidrogenase sob condições de pH adequadas para completar o processo de redox do substratoAlém disso, o HEPES também trabalha em conjunto com conservantes para manter a estabilidade do reagente II e prolongar a vida útil do kit de reagente.

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