Aplicação do Tampão Biológico HEPES 7365-45-9 em Kit de Detecção de Lactato Desidrogenase

Como indicador chave no diagnóstico clínico e na investigação biológica, a estabilidade e a precisão dos kits de detecção da lactato desidrogenase (LDH) afetam directamente a fiabilidade dos resultados experimentais.Entre os vários componentes do kit de reagente, o amortecedor biológico de ácido 4-hidroxietilpiperazina-etanosulfônico (Reservatório HEPESO sistema de detecção de pH é um dos mais importantes sistemas de detecção de pH.

Propriedades químicas e vantagens do HEPES

O HEPES é um agente de amortecimento biológico zwitteriónico, cuja estrutura molecular inclui um anel de piperazina, hidroxietil e grupos de ácido sulfónico, dotando-o de excelente capacidade de amortecimento.O seu valor de pKa é 7.55, próximo do valor de pH fisiológico, apresentando um desempenho de amortecimento eficiente na gama de pH 6,8-8.2, especialmente adequado para reações biológicas em condições de neutralidade a baixa alcalinidade.O HEPES tem as seguintes vantagens significativas::

Hepes em pó

1Baixa adsorção: a sua inércia superficial pode reduzir a adsorção não específica de biomoléculas como proteínas e enzimas, evitando erros experimentais;

2Estabilidade a temperatura: não se decompõe facilmente a temperaturas convencionais de laboratório, adequado para experiências a longo prazo e conservação de amostras;

3Biocompatibilidade: não é tóxico para as células, não afecta a actividade enzimática ou o metabolismo celular e cumpre os requisitos de segurança dos testes biológicos.

Para a detecção de LDH, o kit de reagente deve simular o ambiente intracelular in vitro.evitar distorções da actividade enzimática ou degradação da amostra causadas por flutuações do pH.

O mecanismo do HEPES no kit de detecção de LDH

O princípio central da detecção de LDH é reduzir o NAD+ para NADH através de reação enzimática, que reage com agentes cromogênicos (como o INT) para gerar produtos de formaldeído mensuráveis.Durante este processoO HEPES garante a precisão da detecção através dos seguintes mecanismos:

1Estabilidade do pH: no sistema de reacção do kit de reagente, o tampão HEPES pode neutralizar os íons hidrogénio ou íons hidroxido gerados durante o processo de reacção, manter um pH constante,e garantir que a reacção enzimática se desenvolva em condições ótimas;

2Anti-interferência: a sua baixa resistência iónica pode reduzir a interferência de impurezas (tais como sais e proteínas) na amostra na reação,e melhorar a sensibilidade e especificidade da detecção;

3. Prolongamento da vida útil: Durante a fase de armazenamento do kit de reagente, o HEPES pode prevenir a inativação de enzimas ou reagentes de cor causada pela deriva do pH e prolongar o período de validade do reagente.

Tomando como exemplo um kit de detecção de citotoxicidade da lactata desidrogenase, seu sistema de reação inclui tampão HEPES, substrato de lactato, NAD + e reagente de cor.HEPES tampão (pH 7.5) pode manter de forma estável o ambiente de reacção enzimática, assegurando uma relação linear entre a taxa de geração de NADH e a intensidade de cor dos produtos de formaldeído,Assim, quantificando com precisão a atividade da LDH através de métodos colorimétricos.

Embalagem do produto

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