O mecanismo de ação do tampão biológico MES 4432-31-9 no kit PCR

Em experimentos de biologia molecular, a tecnologia PCR (reacção em cadeia da polimerase) tornou-se uma ferramenta central devido à sua capacidade de amplificar eficientemente fragmentos específicos de DNA.As reações de PCR são extremamente sensíveis às condições ambientais, especialmente pequenas flutuações do pH, que podem afectar directamente a actividade da ADN polimerase, a eficácia de ligação dos primers e modelos, e até levar a uma amplificação não específica.Entre os muitos "heróis dos bastidores" que mantêm a estabilidade dos sistemas de reação, ácido 2- (N-morfolino) etanosulfónico (Reservatório MES), como um eficiente tampão biológico, tornou-se um "guardião invisível" indispensável nos kits de PCR devido às suas propriedades químicas únicas.

1,Regular com precisão o pH

Cada etapa da reação de PCR - desnaturação, recozimento e alongamento - depende da catalização precisa da polimerase do DNA, e a atividade da enzima é altamente dependente do ambiente de pH.O valor pKa do MES é, o que lhe permite apresentar uma excelente capacidade de amortecimento em condições de baixa acidez. MES effectively resists pH fluctuations caused by temperature changes (such as acidic substance release during high-temperature denaturation) or reagent addition during the reaction process by dynamically balancing protonation and deprotonation, estabilizando o ambiente de reacção dentro da gama de pH ideal da DNA polimerase.evitar uma diminuição da eficiência de amplificação ou produtos impuros causados por desequilíbrio de pH.

MES em pó

2,Vantagem de compatibilidade

Em comparação com outros agentes tampões, a estrutura molecular do MES confere-lhe uma vantagem de compatibilidade única.Mas também reduz o risco de interação com outros componentes nas reações de PCRPor exemplo, o Mg 2+ é um cofator essencial para a ADN polimerase, mas quantidades excessivas ou insuficientes podem afetar a eficiência da amplificação.O ambiente fraco ácido do MES ajuda a manter a solubilidade e a forma ativa do Mg 2 +, evitando uma diminuição da concentração efetiva devido à ligação de agentes tampão com íons metálicos.reduzindo ainda mais a probabilidade de dimerização do primer ou de amplificação não correspondente, garantindo a obtenção de produtos altamente específicos.

3,Adaptabilidade à temperatura

A reação de PCR requer ciclos entre altas e baixas temperaturas, o que representa um sério desafio para a estabilidade do tampão.durante a fase de alta temperatura, a sua capacidade de amortecimento não é afectada pela temperatura e o pH permanece estável; durante a fase de recozimento a baixa temperatura, pode restabelecer rapidamente o estado de equilíbrio,assegurar a ligação precisa dos primers e modelosEsta característica torna o MES uma escolha ideal para PCR de fragmentos longos ou PCR de alta fidelidade - o primeiro requer um tempo de extensão mais longo,enquanto este último depende da elevada actividade sustentada da enzima, e o efeito de amortecimento estável do MES fornece um apoio fiável para ambos.

Embalagem do produto

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