Por que os agentes redutores precisam ser adicionados ao tampão Tris 150-25-4

No campo da ciência biológica, especialmente no estudo da química e bioquímica das proteínas, a manutenção da estabilidade e atividade das proteínas é crucial.Como principal executor das actividades da vida, a integridade da estrutura e da função da proteína tem um impacto decisivo em vários processos de vida dentro das células.As proteínas são facilmente afectadas por vários factores ambientais, levando a uma diminuição da sua estabilidade e atividade.que pode destruir a estrutura e a função das proteínas oxidando resíduos de aminoácidos como a cisteína.

Tris tampão

Para resolver este problema, os cientistas utilizam tipicamente soluções tampão contendo agentes redutores, tais comoTris tampãoO tampão Tris é amplamente utilizado devido à sua excelente capacidade de tampão e estabilidade,Mas usar o tampão Tris sozinho não é suficiente para proteger eficazmente as proteínas de danos oxidativosPor conseguinte, a adição de agentes redutores tornou-se um passo importante.

Três agentes redutores comuns no tampão Tris
 

1Ditiotreito (DTT)

O DTT é um agente redutor orgânico de pequenas moléculas comumente usado, e a adição de DTT ao tampão Tris pode prevenir a oxidação da proteína.é uma molécula linear que se transforma em uma estrutura cíclica hexagonal contendo ligações dissulfuradas após oxidaçãoNo experimento, a concentração de DTT é geralmente de 5 a 10 mM para assegurar que a concentração do agente redutor seja muito superior à concentração de proteína no tampão,protegendo assim a proteína contra danos oxidativos.

2. Tri (2-carboxietil) fosfina (TCEP)

O TCEP é um agente redutor de tiol com amplas aplicações na investigação em química de proteínas e proteómica.mas também não precisa ser removido em certas reações de ligação cruzada de tióisAlém disso, o TCEP tem uma boa estabilidade, mas o seu preço é relativamente elevado.

3. Mercaptoetanol (β-mercaptoetanol, BME)

O mercaptoetanol é um agente redutor comumente usado que pode proteger os grupos tiólicos livres das proteínas da oxidação, evitando assim a agregação ou desnaturação das proteínas.A capacidade redutora do mercaptoetanol é relativamente fracaAlém disso, devido à volatilidade do mercaptoetanol, o seu teor é muito baixo.pode ser adicionado à solução de poço e difundido em gotas através da sua volatilização para proporcionar uma redução sustentada.

Embalagem do produto

Precauções de utilização

O tampão de Tris é geralmente preparado à temperatura ambiente, mas os agentes redutores como o DTT e o mercaptoetanol são facilmente degradados à temperatura ambiente.Se estes agentes redutores forem adicionados ao amortecedorAlém disso, podem ser adicionados agentes redutores ao tampão Tris antes do experimento para garantir bons resultados.

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