Como preparar solução tampão de Hepes CAS 7365-45-9

Compreender a importância da solução tampão HEPES

O HEPES, como bom tampão de iões de hidrogénio, pode resistir eficazmente à influência de factores externos (como o CO2,alterações de temperatura) sobre o valor de pH das soluções em várias condições experimentais, tais como culturas celularesA sua estrutura química única confere-lhe uma excelente capacidade de amortecimento, sem penetrar no interior das células,assegurar a estabilidade do ambiente celular, tornando- a uma escolha ideal para cultura de células.

HEPES em pó

Fase de preparação: materiais e equipamento

1. Materiais principais: pó de HEPES (alta pureza, geralmente recomendada ≥ 99%), água ultrapura (ou água deionizada), sais necessários (como NaCl, KCl, etc.,adicionado de acordo com as necessidades experimentais específicas), reguladores ácido-base (tais como NaOH, HCl).

2Equipamento: balança electrónica (com precisão de 0,1 mg), agitador magnético, medidor de pH, frasco volumétrico (escolha as especificações adequadas conforme necessário), pipeta e cabeça de arma, cilindro de medição, etc.

Cálculo e Pesagem

1Calcular a quantidade necessária: em primeiro lugar, determinar o volume total e o valor final do pH da solução tampão necessária com base nos requisitos experimentais.Consulte a literatura ou utilize ferramentas em linha para calcular a massa necessária de pó de HEPES e a proporção de outros componentes.

2- Pesagem precisa: utilizar uma balança electrónica para pesar o pó HEPES calculado e outros componentes necessários (como NaCl, etc.), tendo cuidado de evitar a contaminação e a perda.

Dissolver e ajustar o pH

1Dissolução preliminar: adicionar lentamente o pó de HEPES pesado e outros sais em água ultrapura e agitar bem com um agitadoiro magnético até se dissolver completamente.Observe que o calor pode ser gerado durante o processo de dissolução, e a velocidade e o tempo de agitação devem ser adequadamente controlados.

2. Ajustar o pH: utilizar um medidor de pH para monitorizar o valor do pH da solução e adicionar lentamente uma quantidade adequada de NaOH ou solução de HCl para ajustar até que o valor de pH alvo seja atingido.É necessária agitação contínua durante o processo de ajuste para assegurar um valor de pH uniforme.

3. Reverificar: Após a conclusão do ajuste, utilizar novamente o medidor de pH para confirmar o valor de pH da solução e garantir que este seja correto.

Definição e conservação da capacidade

1Volume constante: transferir a solução ajustada para um frasco volumétrico, diluir com água ultrapura até ao volume desejado e continuar a agitar uniformemente.

2Filtração: Para remover possíveis impurezas, a solução pode ser filtrada através de uma membrana estéril.

3Armazenagem: Transferir a solução tampão HEPES preparada para um recipiente limpo, indicando a data de preparação, o valor do pH e informações do utilizador, e armazená-la em frigorífico a 4 °C.Cuidado para evitar congelamento e descongelamento repetidos para evitar afetar o efeito tampão.

Questões que necessitam de atenção

1Durante o processo de preparação, o princípio da operação asséptica deve ser estritamente seguido para evitar a contaminação.

2O pó de HEPES é propenso à absorção de umidade e deve ser selado para evitar a humidade durante o armazenamento.

3A capacidade de ajuste do pH do pó de HEPES de diferentes lotes pode variar ligeiramente, pelo que o valor do pH deve ser re-medido e ajustado cada vez que for preparado.

4O tampão HEPES preparado deve ser utilizado o mais rapidamente possível, uma vez que a sua armazenagem prolongada pode afectar o seu efeito tampão.
A Hubei Xindesheng Material Technology Co., Ltd. vem pesquisando agentes de amortecimento biológico, como o amortecimento Hepes, há quase 20 anos, com rica experiência em pesquisa e produção.É um fabricante de alta qualidade bem conhecido na China.

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