Quais os pormenores a prestar atenção durante o processo de rotulagem do éster de acridina NSP-SA-NHS 199293-83-9

A aplicação de reagentes de quimioluminescência está a tornar-se cada vez mais difundida em domínios como a biomedicina, a monitorização ambiental e a análise de medicamentos.Éster de acridina NSP-SA-NHSÉ altamente favorecido como um marcador de quimioluminescência eficiente devido à sua boa estabilidade, atividade e sensibilidade.É necessário respeitar rigorosamente uma série de detalhes para garantir a precisão dos resultados experimentais e a estabilidade dos reagentes.Este artigo explorará essas precauções em detalhe para ajudar os pesquisadores a concluir com sucesso os experimentos.

Armazenamento e preparação de reagentes

1Selar e evitar a luz

O éster de acridina NSP-SA-NHS é extremamente sensível à luz, o que pode causar decomposição parcial e afectar o efeito de luminescência.É necessário evitar rigorosamente a luz durante o processo experimental e a armazenagem do produto.Recomenda- se armazenar os reagentes em frascos escuros e opacos bem selados e em local frio.

pó de éster de acridina NSP-SA-NHS

2Armazenamento a baixa temperatura

Para evitar que o reagente absorva umidade e se deteriore, o éster de acridina NSP-SA-NHS deve ser armazenado a baixas temperaturas.Normalmente, recomenda-se armazenar os reagentes na geladeira e verificar regularmente a vedação para garantir que os reagentes não estejam úmidos.Quando utilizado, deve ser retirado com antecedência de acordo com as necessidades experimentais para evitar a condensação do vapor de água causada por diferenças de temperatura.

3Selecção de solventes

Antes da rotulagem, devido à ativação do grupo carboxilo terminal do éster de acridina NSP-SA-NHS pelo NHS, que é mais ativo,Para a dissolução devem ser utilizados solventes anidros secos não protónicos, tais como DMSO anidro ou DMF.Garantir a qualidade e a pureza do solvente para evitar interferências no processo de rotulagem.

Optimização das condições de marcação

1Preparação da solução tampão de marcação

A preparação do tampão de rotulagem é crucial para o efeito de rotulagem. Geralmente, recomenda-se usar 0,2M NaHCO3 (pH=9.0) como tampão de rotulagem para fornecer um ambiente alcalino adequado.Além disso,, outras soluções de amortecimento adequadas podem ser selecionadas de acordo com os requisitos experimentais, como o PBS de 20 mM.

2- Controle da relação de marcação e do tempo

Durante o processo de rotulagem, a proporção molar de anticorpos (proteínas) para ésteres de acridina deve ser ajustada de acordo com os requisitos experimentais.A duração do tempo de marcação afetará diretamente o efeito de marcação..

Purificação e detecção dos produtos rotulados

1Purificação dos produtos rotulados

Após a rotulagem, o produto rotulado precisa ser purificado por diálise, coluna de dessalinização ou ultrafiltração para remover ésteres de acridina não reagidos e outras impurezas.Para compostos de grandes moléculas, tais como proteínas, recomenda-se utilizar uma coluna de dessalinização para a separação; para compostos de pequenas moléculas, recomenda-se utilizar cromatografia por coluna para a separação.

2Detecção da eficiência da marcação

A eficiência da detecção da rotulagem do éster de acridina depende principalmente das suas propriedades de quimioluminescência.Medição da intensidade de luminescência exibida por biomoléculas rotuladas em solução alcalina de peróxido de hidrogénio, a eficácia da rotulagem pode ser reflectida indirectamente. The usual practice is to compare the luminescence intensity data obtained under different labeling conditions (such as different concentrations or reaction times) to determine the optimal labeling conditions.

Embalagem do produto

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