Quais são as razões para a luminescência anormal da acridina hidrazida NSP-SA-ADH

Acrilamida hidrazida NSP-SA-LDH, como um marcador de quimioluminescência altamente sensível, é amplamente utilizado em detecção biomédica, monitoramento ambiental e campos de análise de drogas.A sua estrutura única de anel acridina e o grupo acilhidrazina dotam-no de elevada estabilidade, forte hidroflicidade e capacidade de rotulagem específica, mas pode ocorrer luminescência anormal durante o processo experimental devido a fatores como operação, ambiente ou características do reagente.

1,A contaminação por reagente e resíduos provocam um aumento do sinal de fundo

Resíduo não desenterrado: se o reagente NSP-SA-ADH com acridina hidrazida em excesso não for completamente apagado após acoplamento com anticorpos,As moléculas residuais podem participar diretamente na reação de luminescência, levando a um reforço do sinal não específico.

Acrilamida hidrazida NSP-SA-ADH pó

Agregação de anticorpos: durante o processo de acoplamento, os anticorpos formam agregações devido a obstáculo estérico ou pH inadequado,que não só reduz a eficácia da rotulagem, mas também pode interferir nas reações imunes, levando a sinais de detecção anormais.

2,O desequilíbrio do sistema de reação leva a flutuações na eficiência da luminescência

Adaptabilidade do buffer: Differences in the concentration or batch of surfactants and biological matrices (such as BSA and casein) in the reaction buffer may affect the luminescence stability by altering the solubility or non-specific adsorption of the acridine hydrazide NSP-SA-ADH reagent.

Compatibilidade de anticorpos:Diferentes marcadores (como o éster de acridina e a fosfatase alcalina) associados a anticorpos podem resultar em alterações na sensibilidade de detecção devido a diferenças estruturais espaciais.Por conseguinte, é necessário otimizar o processo de rotulagem com base nas características dos anticorpos.

3,Os fatores ambientais interferem no desempenho da quimioluminescência

Fluctuações de temperatura: a acrilamida hidrazida NSP-SA-ADH tem a melhor estabilidade à temperatura ambiente.levando a uma diminuição do rendimento quântico de fluorescência ou ao branqueamento fotográfico acelerado.

Polaridade do solvente: os solventes polarizados podem interferir na transição do nível de energia das moléculas de hidrazido de acridina NSP-SA-AHH através da ligação de hidrogénio,enquanto as alterações de pH podem causar alterações no estado de ionização molecular, afectando directamente o comprimento de onda e a intensidade da emissão de fluorescência.

Efeito de fotoblanqueamento: sob irradiação luminosa contínua e forte, a estrutura molecular da acridina hidrazida NSP-SA-ADH pode sofrer danos irreversíveis devido a múltiplos ciclos de relaxamento por excitação,resultando numa diminuição da intensidade da fluorescência ao longo do tempo.

4,Solução e estratégia de otimização

Procedimentos operacionais rigorosos: Prepare a solução necessária de NSP-SA-ADH de hidrazida de acridina num banco super limpo, utilizando um recipiente selado para evitar a influência do ar ou das impurezas;Os reagentes residuais foram apagados com tampão Tris e purificados com uma coluna de dessalinização..

Otimizar o sistema de reação: ajustar o valor de pH (6,5-8,0), a concentração de sal (50-200 mM) e o tipo de surfactante de acordo com as características do anticorpo para evitar a agregação de contas magnéticas;Calibrar regularmente as diferenças dos lotes de amortecimento.

Controlo das variáveis ambientais: armazenar os reagentes num ambiente de temperatura (25 ± 1 °C) e umidade (< 40%) constantes, evitando a exposição direta à luz;Equilibrar os reagentes à temperatura ambiente antes da experiência para reduzir o impacto das flutuações de temperatura.

Validação da eficácia da rotulagem: foi utilizado HPLC para detectar a taxa de rotulagem NSP-SA-ADH da acridina hidrazida e o tempo de reação e a temperatura foram otimizados;Utilização de colunas cromatográficas de alta resolução para separar agregados e melhorar a especificidade do sinal.

Embalagem do produto

A Hubei Xindesheng Material Technology Co., Ltd. é especializada na investigação e produção dereagentes de quimioluminescência, com insights únicos no desenvolvimento de produtos, produção e uso, e pode fornecer aos clientes um excelente suporte técnico.Por favor, clique no site oficial para saber mais detalhes ou entre em contato comigo!