O papel do trihidroximetilaminometano 77-86-1 em experimentos de Western blot

Western blot é uma técnica clássica em biologia molecular para a detecção de proteínas específicas, que envolve várias etapas, tais como processamento de amostras, separação eletróforética, impressão de transferência,e detecção de anticorpos.Trihidroximetilaminometano, como um agente tampão do núcleo, fornece apoio crítico para a precisão e reprodutividade dos experimentos, mantendo um ambiente de pH estável, otimizando a resistência dos íons,e proteção da actividade proteica.

1,Ambiente de pH estável, protegendo a estrutura da proteína

A distribuição de carga, a solubilidade e a exposição ao epitopo do antígeno das proteínas são altamente dependentes do valor de pH. A faixa de amortecimento do trihidroximetilaminometan (pH 7,0-9.0) é altamente compatível com as condições comumente utilizadas em experimentos de Western blot, e pode resistir eficazmente às flutuações do pH causadas pela adição de reagentes químicos ou reações eletroquímicas durante o processo experimental.

Trihidroximetilaminometano em pó

Durante a fase de lisise da amostra, o tampão de lisise contendo trihidroximetilaminometanos mantém um ambiente neutro a pouco alcalino, inibe a atividade endógena da protease,e impede a degradação da proteína alvoNa preparação do gel SDS-PAGE, o trimetilaminometano, a acrilamida, o persulfato de amónio e outros componentes formam conjuntamente um sistema de polimerização estável,cuja estabilidade do pH garante que o diâmetro dos poros do gel seja uniforme, e evita a precipitação ou mudança de conformação da proteína devido à acidificação local.o trihidroximetilaminometano no tampão de transferência neutraliza a carga superficial da membrana, reduz a ligação não específica entre a proteína e a membrana, e protege ainda mais a antigenicidade da proteína.

2,Otimizar o sistema de eletroforese para obter uma separação precisa

O projeto de concentração do trihidroximetilaminometano foi otimizado: uma concentração demasiado baixa pode conduzir a condutividade insuficiente e a corrente instável.Pode causar aquecimento do gel ou difusão de bandaA sua força iônica moderada pode não só assegurar a eficiência da eletroforese, mas também manter a estabilidade do tamanho dos poros do gel,para que diferentes proteínas de peso molecular possam ser separadas claramente.

3,Promover a eficiência da transferência e assegurar a migração completa das proteínas

Manter o equilíbrio iónico: o aminometano Tris (hidroximetil), a glicina e o metanol juntos formam uma solução de impressão de transferência.3) garante que a proteína mantenha a sua conformação natural durante o processo de impressão de transferência, evitando desnaturação ou precipitação.

Otimizar a condução do campo elétrico: O sistema de glicina de aminometano trihidroximetil forma um gradiente estável do campo elétrico, levando as proteínas a migrar para a membrana a uma taxa constante.O metanol pode destruir a estrutura da rede de gel, enquanto o trimetilolaminometano pode equilibrar a resistência iónica através de amortecimento, evitar a acumulação excessiva de cargas na superfície da membrana,e, assim, melhorar a eficiência de transferência de proteínas de grande peso molecular.

Proteção da proteína da membrana: as propriedades químicas suaves do trihidroximetilaminometan impedem que a proteína da membrana seja danificada por ácidos ou bases fortes,assegurar a exposição completa dos epítopos do antígeno, aumentando assim a sensibilidade e precisão da ligação aos anticorpos.

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