HEPES, ácido ethanesulfonic do piperazine 4 hydroxyethyl, utiliza o reducibility de HEPES aos metais adicionais em valores de pH específicos, e usa o método da redução HEPES-NaOH para preparar nanoparticles do ouro. Este método é simples operar-se, rápido para reagir, fácil controlar, menos subprodutos, e a favor do meio ambiente.
Preparação de nanoparticles do ouro
1. Prepare a solução ácida chloroauric com concentração de 0.05-10 mmol/L;
2. Prepare o amortecedor de HEPES com concentração de 5-50 mmol/L, e ajuste o valor de PH do amortecedor de HEPES a 7.0-8.0 com hidróxido de sódio;
3. Adicione o surfactant ao amortecedor de HEPES preparado em step2 para preparar a solução do surfactant com uma concentração de 1-2 mmol/L;
4. A solução do surfactant preparada em step3 é introduzida no tanque da reação, e a solução ácida chloroauric preparada em step1 é adicionada lentamente ao tanque da reação de acordo com a relação do molar da solução ácida chloroauric e da solução do surfactant de 1:1-1:10, e agitada a uma velocidade de 200-300r/min. A reação dura para que o minuto 5-30 obtenha uma mistura que contém coloides do nanogold;
5. A mistura preparada em step4 é secada e refinada para obter partículas do nanogold.
Tomando o amortecedor de HEPES com uma concentração de 50 mmol/L como um exemplo, o método da configuração é como segue: em primeiro lugar, 2,38 quilogramas de HEPES são pesados e dissolvidos em 180 litros da água deionized, e então o valor de pH da solução é aproximadamente 5,4 usando um medidor de pH, a seguir 0,1 mol/L da solução do hidróxido de sódio estão adicionados lentamente e agitados continuamente até que o pH esteja ajustado a 7,4; finalmente, a água deionized é adicionada a 200L.
Preparação de HEPES
Método 1
Usando o dichloroethane 1,2 como o solvente, o piperazine hydroxyethyl (5.00g, 0.02mol), carbonato de potássio K2 CO3 (6.00g, 0.04mol), dichloroethane 50mL 1,2 foi adicionado em uma garrafa do três-porto 100mL equipada com o stirring mecânico e o termômetro. O banho do óleo foi aquecido em 90℃ (ponto de ebulição 1,2-dichloroethane 85℃), e a reação foi agitada para 20h.Stop a reação, filtro e lava o sal filtrado com 200 mL de acetato de etilo (EA). O filtrado foi secado para obter 2,6 o sólido de g HEPES.
Método 2
(84.5mmol) o sulfito de sódio 11.0g anídrico, 27,0 mL (343.6mmol) de dichloroethane, 120mL água, 110mL álcool etílico, pó 50mg de cobre foi adicionado em três garrafas com agitador e o tubo magnéticos da condensação da maré baixa por sua vez. O banho do óleo foi aquecido e aquecido à maré baixa. Após a maré baixa para 22h, o líquido da reação foi evaporado sob a pressão reduzida remover a água até que todos os sólidos brancos estiveram precipitados. Este sólido é composto principalmente dos produtos, de matérias primas sem reação e de sal produzidos. O sólido e o álcool etílico 500mL obtidos foram adicionados em uma garrafa 1L e aquecidos para a maré baixa para 40min.Drain e filtro quando quentes, e deixe o filtrado refrigeram-no para baixo, a seguir deixam-n em 0℃ durante a noite. A secagem da filtragem e de vácuo da drenagem conduziu à cristalização do floco com rendimento de 11,40 g e rendimento de 81,0%.
O sulfonate cloroetílico do sódio (15,10 g, 0,08 mol), o piperazine hydroxyethyl (9,88 g, 0,075 mol), 60 mL de água e o banho do óleo foram adicionados em quatro garrafas com agitador, o tubo da condensação da maré baixa e o termômetro magnéticos para agitar a reação em 105℃. Enquanto a reação continuou, o pH da solução da reação diminuiria, e a solução aquosa de 5 mol/LNaOH foi adicionada gota a gota para controlar aproximadamente o pH 9. Um total de 15 mL foi adicionado e a reação continuou para 5h.
No fim da reação, a solução da reação foi diluída a 500mL com água, e a coluna superior da resina da troca iônica (sobre 500g) foi dessalinizada e refinada. Depois que a solução da reação foi carregada toda na coluna, foi lavada com água destilada até que o pH da efluência esteve 6, e lavada então com água de amônia 1mol/L. A efluência com pontos do produto (pH aproximadamente 5-9) foi recolhida para a detecção do TLC. A evaporação giratória foi concentrada a 150 mL, descoloração ativada do carbono foi adicionada, banho do óleo era 110℃, aquecimento e o stirring para 0.5h, filtragem, secagem giratória do filtrado, adicionando o álcool etílico 50mL, aquecendo a maré baixa para 0,5 h, filtragem térmica, o sólido branco obtido depois que secar era o filtrado 8.63G.The foi gotejado com ácido acético glacial, ajustado ao pH 5, refrigerado durante a noite em 0℃, e filtrado. O contínuo obtido era 2.80G após a secagem. Um total de 11.43g do sólido de HEPES foi obtido no rendimento 64,5%.
O método da preparação do amortecedor de 10mmol/L HEPES é como segue: pese 2.383g de HEPES exatamente, adicione a água três-cozinhada fresca ao volume constante a 1 esterilização de L.Filtration, armazenamento em 4℃ após o secundário-empacotamento. Se usado como um amortecedor quando adicionado ao meio de cultura celular, recomenda-se que o meio de cultura esteja mantido longe da luz.
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